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作者：宋艳雯;胡霞;杨柳;宋振辉;
单位：西南大学动物医学院;国家生猪技术创新中心;重庆市畜牧科学院;
摘要：为初步评价猪流行性腹泻病毒（PEDV）N基因作为候选疫苗的潜力，本研究利用减毒沙门菌重组表达N蛋白，免疫小鼠后判断其免疫水平。将PEDV LJX毒株的N基因通过同源重组连接至载体pYA3342，并电转入减毒沙门菌SC3，构建表达PEDVN蛋白重组沙门菌SC3(pYA3342-N)。通过RT-PCR和Western-blot验证PEDV N基因在SC3中的稳定遗传表达，经安全性验证后，对7周龄BALB/c雄鼠进行免疫试验，通过RT-qPCR检测IFN-γ表达水平，通过ELISA检测小鼠血清Ig G抗体和黏膜sIgA抗体水平变化。结果，成功构建重组减毒沙门菌SC3(pYA3342-N),SC3(pYA3342-N)组与SC3组的小鼠IFN-γ表达水平显著高于空白对照组，说明减毒沙门菌能够进入并刺激肠道细胞，引起细胞免疫；与SC3组和空白对照组相比，SC3(pYA3342-N)组小鼠血清Ig G抗体和黏膜sIgA抗体水平有极显著差异，且血清Ig G抗体水平随着免疫次数的增加呈上升趋势。重组减毒沙门菌SC3(pYA3342-N)能有效刺激小鼠产生一定的细胞免疫、体液免疫和黏膜免疫反应。本研究初步证明PEDV N蛋白具有作为疫苗的潜力，为后续研发PEDV口服活载体疫苗奠定了基础。
关键词：猪流行性腹泻病毒;;N蛋白;;重组减毒沙门菌;;免疫效果评价
基金资助：中央高校基本业务专项（XDJK2020RC001）;; 国家生猪技术创新中心项目（NCTIP-XD/B11）
