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中国兽医科学2025年第11期:一株新型鸭呼肠孤病毒的分离鉴定及致病性分析

来源:期刊VIP网 时间:


作者:刘国锰;冯晶晶;张武超;雷白时;袁万哲;陈福星;赵款;

单位:河北农业大学动物医学院;

摘要:为了解我国山东省潍坊市新型鸭呼肠孤病毒(novelduck reovirus,NDRV)的流行情况,本研究通过鸭胚传代方法从山东省潍坊市疑似感染NDRV患鸭的肝、脾组织中分离得到1株病毒。经过RT-PCR鉴定、二代测序、同源性比较和对S1基因片段的遗传进化分析,确定该分离株为NDRV。其基因组全长23 419 bp,S1基因编码P10、P18、σC蛋白,遗传进化分析结果显示,分离株与NCBI中NDRV参考毒株处于同一分支,与NDRV J18株同源性最高(98.1%~99.8%),将其命名为NDRV-SDWF-01株。将该分离株接种于鸡肝癌细胞(LMH),增殖5次至F5代,采用间接免疫荧光(IFA)鉴定分离株增殖情况,测定TCID_(50),并绘制在BHK21、Vero和LMH细胞上的生长曲线。结果显示,LMH细胞出现特异性绿色荧光,TCID_(50)为1×10~(-6.4)/0.1 m L,该分离株更适应在LMH细胞上增殖。为进一步探究NDRV-SDWF-01株的致病性,选用3日龄樱桃谷雏鸭,腿部肌肉注射0.2 m L F5代病毒液,发现雏鸭生长发育迟缓,攻毒后第3天起攻毒组雏鸭体重均显著低于阴性对照组;第7天死亡1只雏鸭(死亡率10%);攻毒后第1天检测到排毒,第5天达到峰值,随后下降。本研究结果为NDRV遗传进化分析和疾病防控提供了一定参考。

关键词:新型鸭呼肠孤病毒;;分离鉴定;;遗传进化分析;;致病性

基金资助:“预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室”开放基金课题项目(2021KF03);; 河北农业大学引进人才科研专项(YJ202020)