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作者：田传文;刘英楠;郭伟强;段绪来;王蓉蓉;孙华伟;李遥;周州;王乃东;陈鸿军;
单位：湖南农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所;
摘要：K205R蛋白是非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）编码的非结构蛋白，具有良好的免疫原性。本研究为获得ASFV K205R蛋白多克隆抗体，构建了原核表达质粒pET28a-K205R，在成功表达重组蛋白后，使用His-tag亲和磁珠对重组蛋白进行纯化。以纯化的K205R重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。使用ELISA方法检测其抗体效价，用Western blot和IFA验证多克隆抗体的特异性。结果可知，K205R重组蛋白在原核表达系统中成功表达并纯化，可被His-tag抗体和ASFV阳性血清特异性识别。获得的多克隆抗体具有良好的特异性，能够识别内源性和外源性表达的K205R蛋白，可为后续ASFV K205R蛋白功能的研究和检测奠定了基础。
关键词：非洲猪瘟病毒;;K205R重组蛋白;;原核表达;;多克隆抗体制备
基金资助：十四五重点研发专项（2021YFD1801300,2021YFD1800104）;; 上海市青年科技英才扬帆计划（23YF1457400）;; 中国农业科学院农业科学技术创新项目（CAAS-ZDRW202203）;; 中央公益性科研单位基础研究基金（Y2022PT11）
