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作者：季裕婷;杨姗姗;刘楚鑫;唐国瑞;王毅;储丽宇;文晓晓;王丽丽;李封赛;芮萍;张鼎;侯桂芳;宋涛;马增军;
单位：河北科技师范学院动物科技学院河北省预防兽医学重点实验室;山西农业大学动物医学学院;河北省动物疫病预防控制中心;
摘要：猪德尔塔冠状病毒（Porcine deltacoronavirus,PDCo V）是一种引起猪只腹泻的单股正链RNA病毒，严重威胁了全球养猪业的发展。本研究以真核表达的PDCo V CTD蛋白作为抗原，免疫4周龄Balb/c小鼠，利用单细胞流式分选技术分选出164个与PDCo V CTD蛋白特异性结合的记忆B细胞，反转录后通过巢式PCR扩增抗体轻重链可变区，成功构建了带有鼠源抗体恒定区的真核表达载体，并于HEK-293T细胞上共转染表达了53株抗体。酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）结果显示有16株抗体效价较高。流式抗体阻断试验和中和试验证实其中2株抗体的中和效果均较好，同时表面等离子共振（surface plasmon resonance,SPR）测试结果显示2株抗体的亲和力较高。本研究通过单细胞流式分选技术成功筛选出了PDCo V特异性中和抗体，为防治PDCo V感染提供理论依据和参考价值。
关键词：PDCoV;;CTD;;单细胞流式分选技术;;真核表达;;特异性抗体
基金资助：河北科技计划重点专项（21324801D）;; 现代农业产业技术体系河北省创新团队项目（HBCT2023170208）;; 河北省预防兽医学重点实验室绩效后补助项目（20567621H）;; 秦皇岛科学技术局项目（202302B017）
