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病毒学报2024年第03期:微小RNA-93-5p调控Toll样受体4基因抑制呼吸道合胞病毒感染支气管上皮细胞炎症反应的机制研究

来源:期刊VIP网 时间:


作者:刘淑娇;张勇刚;赵晓燕;

单位:朔州职业技术学院;

摘要:研究miR-93-5p调控TLR4基因抑制呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial sirus, RSV)感染支气管上皮细胞炎症反应。培养人支气管上皮细胞16-HBE,RSV感染,实验分为RSV+miR-NC组、RSV+miR-93-5p组、RSV+si-NC组、RSV+si-TLR4组、RSV+pcDNA-NC组、RSV+pcDNA-TLR4组、RSV+miR-93-5p+pcDNA-NC组、RSV+miR-93-5p+pcDNA-TLR4组。qRT-PCR评估miR-93-5p、TLR4 mRNA表达水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;Western blot检测CyclinD1、P21蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证miR-93-5p对TLR4的靶向调控。与Con组比较,RSV组miR-93-5p表达水平显著降低,TLR4 mRNA表达水平显著增加(P<0.05)。与RSV+miR-NC组比较,RSV+miR-93-5p组16-HBE细胞中miR-93-5p表达水平显著增加,TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低,细胞存活率、CyclinD1蛋白表达显著增加,P21蛋白表达显著降低(P<0.05)。与RSV+si-NC组比较,RSV+si-TLR4组16-HBE细胞中TLR4 mRNA表达水平显著降低,TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低,细胞存活率、CyclinD1蛋白增加,P21蛋白减少(P<0.05)。与RSV+miR-93-5p+pcDNA-NC组比较,RSV+miR-93-5p+pcDNA-TLR4组16-HBE细胞中TLR4 mRNA表达水平显著增加,TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著增加,细胞存活率、CyclinD1蛋白表达显著降低,P21蛋白表达显著增加(P<0.05)。miR-93-5p负调控TLR4基因抑制呼吸道合胞病毒感染支气管上皮细胞炎症反应。

关键词:miR-93-5p;TLR4;呼吸道合胞病毒;支气管上皮细胞;炎症