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作者:韩卫芳;侯美伶;马晶;郝彦哲;李红霞;刘京端;孟号迪;张晓光;
单位:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所生物安全研究中心;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室;北京润博福得生物科技发展有限公司;
摘要:猪感染非洲猪瘟病毒后,发病率和病死率可高达100%,常造成巨大经济损失和社会影响。非洲猪瘟目前没有有效的预防性疫苗,主要防控手段为尽早发现传染源、切断传播途径。目前最常用的非洲猪瘟病毒检测方法是荧光定量PCR,但是该方法耗时长、实验条件要求高,不利于在基层单位使用。本研究通过对非洲猪瘟病毒基因进行分析,针对其中p72基因设计和合成了多条引物探针,通过实验确定最优引物探针浓度、反应退火温度、延伸时间等条件,再结合一体化核酸检测系统,最终建立了基于即时检测(Point-of-care test, POCT)技术的非洲猪瘟病毒核酸快速检测方法。该方法可以在50min内完成核酸提取、扩增和结果判读的检测全流程,并可以有效检出大于1000拷贝/mL的标本,为非洲猪瘟病毒防控提供了技术手段。
关键词:非洲猪瘟病毒;核酸检测;即时检测
基金资助:国家重点研发计划(项目号:2021YFC2301103),题目:呼吸道传染病体征自动化监测装置和预警技术研发~~