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作者:潘祝;吴慧慧;刘海燕;张新芳;王媛;徐淑文;张玉洁;刘文美;刘自兵;
单位:安徽中医药大学针灸推拿学院;安徽中医药大学中西医结合学院;
摘要:目的:观察电针“足三里”和“肺俞”对慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠肺组织中皮层肌动蛋白结合蛋白(Cortactin)、肺血管内皮细胞骨架的影响,探讨电针改善COPD炎性损伤的机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分成正常组、模型组、电针组、Cortactin小干扰RNA(si-Cortactin)组、si-Cortactin+电针组,每组10只。香烟暴露12周复制COPD小鼠模型,电针治疗前24 h进行鼻腔滴注si-Cortactin,电针双侧“足三里”和“肺俞”,每次30 min,隔日治疗1次,连续2周。使用小动物肺功能分析仪检测小鼠肺功能,HE染色观察小鼠肺组织病理情况,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3含量,TUNEL法检测小鼠肺血管内皮细胞凋亡情况,免疫荧光双标法观察小鼠肺血管内皮细胞骨架稳定性,实时荧光定量PCR法检测肺组织Caspase-3和Cortactin mRNA表达,Western blot法检测肺组织Caspase-3和Cortactin蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组用力肺活量(FVC)、第0.05秒用力呼气量(FEV0.05)、第0.1秒用力呼气量(FEV0.1)、FEV0.05占FVC比值(FEV0.05/FVC)及FEV0.1占FVC比值(FEV0.1/FVC)均下降(P<0.001),肺组织炎性浸润明显,血清及BALF中TNF-α和Caspase-3的含量增高(P<0.001),肺组织中肺血管内皮细胞凋亡及细胞骨架结构破坏明显,肺组织中Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平增高,Cortactin mRNA和蛋白表达降低(P<0.001);与模型组比较,电针组上述指标均明显改善(P<0.001,P<0.01,P<0.05);使用si-Cortactin进行干预后,si-Cortactin组上述指标较模型组均进一步加重(P<0.01,P<0.001,P<0.05);相较si-Cortactin组,si-Cortactin+电针组上述指标则有所改善(P<0.001,P<0.05,P<0.01)。结论:电针可减轻COPD小鼠肺组织炎性病理损伤,作用机制可能与其上调Cortactin表达,稳定肺血管内皮细胞骨架,抑制细胞凋亡有关。
关键词:慢性阻塞性肺疾病;;电针;;皮层肌动蛋白结合蛋白;;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3;;细胞骨架;;细胞凋亡
基金资助:安徽省高校自然科学基金重大项目(No.2022AH040078);; 安徽省自然科学基金面上项目(No.2008085MH267);; 安徽省高校自然科学基金重点项目(No.KJ2021A0569、KJ2021A0599)