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作者：颜雪华;朱浩;陈帅;张改月;张豪斌;杨金生;王莹莹;
单位：陕西中医药大学针灸推拿学院;陕西中医药大学第二附属医院;中国中医科学院中医基础理论研究所;中国中医科学院针灸研究所;
摘要：目的：观察刮痧对膝关节骨关节炎（KOA）大鼠膝关节软骨组织炎性因子、细胞凋亡及自噬的影响，探讨刮痧治疗KOA的作用机制。方法：SD大鼠随机分为空白组、模型组和刮痧组，每组17只。采用右膝关节腔内注射谷氨酸钠碘乙酸复制KOA大鼠模型。刮痧组选择右侧“阳陵泉”“血海”进行刮痧治疗，频率为1次/s，按压力度在0.3～0.5 kgf，隔日干预1次，连续干预7次。记录各组大鼠右膝关节周径变化；HE染色法观察大鼠右膝关节软骨病理形态变化；ELISA法检测大鼠右膝关节软骨组织中白细胞介素（IL）-1β及肿瘤坏死因子（TNF）-α含量；荧光定量PCR法和Western blot法分别检测大鼠膝关节软骨组织中自噬性关键小分子酵母Atg6的同素系物（Beclin-1）、微管相关结合蛋白1轻链蛋白酶复合物3Ⅱ/Ⅰ型（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）、泛素相关结合蛋白62(P62)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA和蛋白的表达水平；TUNEL染色观察大鼠膝关节软骨细胞的凋亡情况；免疫荧光法检测大鼠右膝关节软骨中LC3的表达水平。结果：造模后，与空白组比较，模型组右侧膝关节周径明显增大（P<0.01）；软骨层有明显的紊乱和缺损，软骨细胞大量坏死，有纤维增生及大量骨小梁破坏；软骨组织细胞凋亡率、IL-1β和TNF-α含量及Caspase-3、P62 mRNA和蛋白表达水平均升高（P<0.01,P<0.001）,Beclin-1、LC3 mRNA和蛋白表达水平和LC3平均荧光强度降低（P<0.01,P<0.001）。治疗后，与模型组比较，刮痧组右侧膝关节周径缩小（P<0.05）；软骨层排列趋于正常，炎性细胞浸润程度较低；软骨组织细胞凋亡率、IL-1β和TNF-α含量降低（P<0.05）,Caspase-3、P62mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.01,P<0.05）,Beclin-1、LC3 mRNA和蛋白表达水平及LC3平均荧光强度升高（P<0.05）。结论：刮痧能够改善KOA大鼠关节软骨损伤，抑制炎性因子过量释放，减少软骨细胞凋亡率。这可能与上调Beclin-1、LC3的表达，降低P62、Caspase-3的表达，促进KOA大鼠软骨细胞自噬有关。
关键词：刮痧;;膝关节骨关节炎;;自噬;;细胞凋亡
基金资助：国家自然科学基金项目（No.82074563）;; 2022年国家中医药管理局青年岐黄学者培养项目
