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作者：伏厚宇;李晓辰;龚子健;揭立士;刘江宇;陈颖琦;王培民;
单位：南京中医药大学附属医院/江苏省中医院;南京中医药大学第一临床医学院;
摘要：目的 从环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）-干扰素基因刺激蛋白（STING）信号通路探讨膝痹宁治疗膝骨关节炎软骨损伤的可能作用机制。方法 将50只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、膝痹宁低剂量组、膝痹宁高剂量组、膝痹宁高剂量+激动剂组，每组10只。除假手术组外，其余各组小鼠采用半月板失稳术构建膝骨关节炎小鼠模型。术后2周，膝痹宁低、高剂量组分别给予3.58、14.32 g/（kg·d）膝痹宁汤剂灌胃给药，膝痹宁高剂量+激动剂组使用14.32 g/（kg·d）膝痹宁汤剂灌胃后，按25 mg/kg腹腔注射2,5-己酮可可碱，假手术组与模型组给予5 ml/（kg·d）生理盐水灌胃，每日1次，各组均连续干预4周。采用ELISA法检测各组小鼠血清肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)表达水平；苏木素-伊红、番红O-固绿染色观察软骨组织病理变化，并根据Mankin评分标准对病理变化进行评分；Western Blot法和qPCR法分别检测软骨组织基质调控相关指标[基质金属蛋白酶3 (MMP3)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、含血小板反应蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)、Ⅱ型胶原（COLⅡ）、聚集蛋白聚糖（Aggrecan）]水平及cGAS-STING通路相关指标（cGAS、STING）蛋白水平及mRNA表达。结果 与假手术组比较，模型组小鼠软骨边缘破坏严重，Mankin评分升高，COLⅡ、Aggrecan蛋白及mRNA表达水平降低，cGAS、STING、MMP3、MMP13、ADAMTS5蛋白及mRNA表达水平升高（P<0.01）；与模型组比较，各干预组小鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平均降低（P<0.01）；与膝痹宁高剂量组比较，膝痹宁低剂量组及膝痹宁高剂量+激动剂组IL-6、IL-1β、TNF-α水平均升高（P<0.01）。与模型组比较，膝痹宁低、高剂量组和膝痹宁高剂量+激动剂组小鼠软骨病理改变减轻，Mankin评分降低，COLⅡ、Aggrecan蛋白及mRNA表达水平升高，cGAS、STING、MMP3、MMP13、ADAMTS5蛋白及mRNA表达水平降低（P<0.01）；与膝痹宁高剂量组比较，膝痹宁高剂量+激动剂组小鼠软骨边缘破坏，Mankin评分升高，COLⅡ、Aggrecan蛋白及mRNA表达水平降低，cGAS、STING、MMP3、MMP13、ADAMTS5蛋白及mRNA表达水平升高（P<0.01）。结论 膝痹宁可能通过抑制cGAS-STING通路，降低基质降解相关蛋白，升高基质组成相关蛋白，从而改善膝骨关节炎软骨损伤。
关键词：膝骨关节炎;;软骨损伤;;膝痹宁;;环鸟苷酸-腺苷酸合成酶;;干扰素基因刺激蛋白;;基质金属蛋白酶
基金资助：国家自然科学基金（82305276）;; 江苏省中医药科技发展项目（QN202105）;; 江苏省中医院膝关节骨关节炎临床医学创新中心（Y2023zx05）;; 江苏省医学重点学科（实验室）培育单位（JSDW202252）;; 江苏省高等学校大学生创新创业训练计划（202410315091Y）
