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作者：张鼎;胡芷涵;宋晨曦;李方存;姜明贺;陈炜;胡跃强;
单位：广西中医药大学研究生院;上海中医药大学;广西中医药大学第一附属医院;
摘要：目的：探讨温肺降浊方通过Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤对线粒体自噬的影响。方法：通过重组大鼠β-NGF分化PC12细胞，Aβ_(25-35)干预其成为阿尔茨海默病细胞模型，确定Aβ_(25-35)造模的最佳浓度和时间点，设立温肺降浊方含药血清低(2%)、中(4%)、高(8%)浓度组。MDC染色和JC-1染色法观察自噬小体和线粒体膜电位，免疫荧光化学染色、qPCR和Western Blot检测各组细胞中PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达。结果：β-NGF分化PC12细胞在第6天后成为海马神经元细胞形态结构，AD细胞造模条件以5μmol/L终浓度的Aβ_(25-35)干预48 h最佳。与正常对照组比较，模型组自噬小体显著增多，线粒体膜电位明显降低，PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较，温肺降浊方含药血清可使模型细胞自噬小体减少，线粒体膜电位明显升高，PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论：温肺降浊方可减轻Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤，其机制可能与PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬通路有关。
关键词：温肺降浊方;;Aβ_(25-35);;PC12细胞;;PINK1/PARKIN;;线粒体自噬
基金资助：国家自然科学基金项目(82260904);; 广西中医脑病临床研究中心项目(桂科AD20238028);; 广西高等学校高水平创新团队及卓越学者计划(桂教人才202006);; 广西中医药大学博士研究生创新项目(YCBXJ2023010)
