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作者：刘聪;钱炳旭;温渊;汤芳;戴建君;薛峰;
单位：南京农业大学动物健康与食品安全国际合作联合实验室;中国药科大学;南京农业大学三亚研究院;
摘要：为实现抗牛结节性皮肤病病毒（LSDV）药物的高内涵筛选（HCS），选取LSDV复制非必需基因TK作为增强绿色荧光蛋白（EGFP）的插入区域，构建了表达EGFP的重组LSDV，该重组病毒rLSDV-ΔTKEGFP与野生型LSDV的生长特性无明显差异。基于rLSDV-ΔTK-EGFP，建立了抗LSDV药物的高内涵快速筛选方法，使用该方法对天然产物库中的1 036个化合物进行了筛选。结果显示，该方法筛选到5个具有抗LSDV活性的化合物。进一步检测LSDV117蛋白表达水平和LSDV043基因拷贝数，结果表明，在MDBK细胞上经过5种化合物处理后可以显著抑制LSDV，且化合物浓度为10μmol/L时，均无明显细胞毒性。上述结果表明，构建的表达EGFP的重组LSDV可以用于抗LSDV药物的高内涵筛选，具有较高的筛选效率，对于提高动物个体抗病毒能力，缓解牛结节性皮肤病症状，减少经济损失等方面具有重要意义。
关键词：牛结节性皮肤病病毒;;EGFP;;抗病毒药物;;高内涵筛选
基金资助：国家重点研发计划项目（2023YFF0611500）;; 南京农业大学三亚研究院成果转化资金项目（NAUSY-CG-YB14）
