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作者：黄石磊;谢录异;宋振辉;
单位：重庆三峡职业学院动物科技学院;西南大学动物医学院;重庆安全技术职业学院;
摘要：为探究猪气道上皮细胞纤毛停滞对猪呼吸道冠状病毒（PRCoV）在肺上皮细胞上增殖的影响，本研究构建了一种新的离体感染模型——精密肺组织切片（PCLS）。在验证模型组织活力满足试验要求后，用2%NaCl将气道上皮细胞的运动纤毛进行停滞，使用病毒噬斑、免疫荧光等技术研究离体模型气道上皮纤毛停滞对PRCoV增殖的影响。结果显示，在停滞状态下，PRCoV感染肺精密切片，纤毛活性比未停滞状态下降得快；经PFU病毒滴度检测，停滞状态下感染PRCoV的病毒滴度显著高于未停滞状态；经冰冻切片和免疫荧光分析，停滞组的PRCoV N蛋白表达量显著高于未停滞组，且荧光强度更强。综上结果表明，气道上皮细胞纤毛停滞更利于病毒的感染和增殖。本研究所建立的肺组织离体感染模型可有效存活并用于病毒感染性试验，肺纤毛停滞可促进PRCoV在肺上皮细胞增殖，模型结果和在动物体内肺纤毛运动功能障碍可促进病原微生物增殖的结果一致，表明离体感染模型能有效提供部分动物试验的场景需求，可为实验动物替代研究提供理论支撑。
关键词：猪呼吸道冠状病毒;;精密肺组织切片;;肺纤毛
基金资助：重庆市教委科学技术研究资助项目（KJQN202203513）;; 重庆三峡职业学院重点科研项目（cqsx2021001）
