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作者：李桂珍;魏开赟;李嘉彬;李舜;付强;马春全;邹永新;梅敏敏;刘敏芳;王亚欣;
单位：广东科贸职业学院动物科技学院;中牧实业股份有限公司;佛山大学动物科技学院;
摘要：为能够快速检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）特异性抗体水平并评估疫苗免疫效果，采用PEDV病毒液作为包被抗原，抗PEDV卵黄抗体（IgY）作为竞争抗体，通过方阵法确定反应的最优条件，建立一种抗PEDV的竞争性ELISA检测方法。实验优化结果表明最佳条件为：37℃孵育2 h后置于4℃过夜进行抗原包被；使用10 g/L BSA于37℃封闭2 h；血清稀释度为1∶5；竞争性一抗质量浓度为0.01 g/m L；二抗稀释度为1∶3 000；血清、抗体均在37℃孵育30 min;TMD底物显色液在25℃避光反应15 min。设定阴阳性的临界值分别为阳性（PI）≥0.420，阴性（PI）<0.325后，在对30份血清样本进行标准化试剂盒与本研究方法的检测对比中，符合度为78.3%；该方法的批内和批间重复变异系数在1.1%～8.7%之间，均小于10%，证明其具有较好的重复性和可靠性。因此，该抗PEDVIg Y竞争ELISA为PEDV感染的精准防控提供了一种有效工具。
关键词：猪流行性腹泻病毒;;卵黄抗体;;竞争ELISA
基金资助：广东省重点领域研发计划项目（2019B020217002）;; 广东省教育厅高校科研项目（2017-KTSCX193）;; 佛山市科技创新项目（2020001004909）;; 广州市科技计划项目（201804010489）;; 广东科贸职业学院2023年度校级科研项目（GDKM2023-13）
