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中国艾滋病性病2025年第02期:HIV RNA数字PCR检测方法的建立

来源:期刊VIP网 时间:


作者:狄宇;彭海艳;朱杰;姚栋;欧新华;杨柳青;

单位:长沙市疾病预防控制中心;

摘要:目的 建立HIV RNA数字PCR检测方法,为HIV感染诊断提供一个精准、灵敏的检测方法。方法 参考国内外相关文献,选择文献中提供的以HIV基因不同区域为检测靶基因的引物和探针序列进行合成。以梯度稀释的RNA为模板,评估检测拟合优度;采用不同浓度的模板进行多重复检测,评估检测精密度、空白限和检出限。结果根据文献所合成的引物和探针可成功检测HIV RNA的目标基因;GAG区的拟合优度R2=0.999,LTR区的拟合优度R2=1。本方法在检测高、中浓度核酸时变异系数CV均小于10%,检测低浓度核酸(浓度<20拷贝/μL)时变异系数CV均大于10%。本方法的GAG区的检测空白限为1.8拷贝/μL,检出限为4.8拷贝/μL;LTR区的检测空白限为7.2拷贝/μL,检出限为10.2拷贝/μL。结论 本研究成功建立了HIV数字PCR检测方法,可尝试将其用于HIV实验室检测流程。

关键词:1型艾滋病病毒;;数字聚合酶链式反应;;拟合优度;;精密度;;空白限;;检出限

基金资助:湖南省自然科学基金,部门联合基金(2023 JJ60399)~~