来源：期刊VIP网 时间：
作者：姚欣;邹沛璇;郑永祥;余蓉;
单位：四川大学华西药学院;
摘要：目的 通过促溶标签和His tag实现抗菌肽Cecropin A在原核系统中的可溶表达和分离纯化，并评价其对铜绿假单胞菌的抗菌活性。方法 将小分子泛素样修饰蛋白标签SUMO以及His tag与Cecropin A融合，构建pET30a(+)-His-SUMO-cecropin A表达载体，通过一步镍亲和层析捕获His-SUMO-cecropin A,经Ulp1酶切后再通过镍亲和层析流穿得到无氨基酸残留的Cecropin A,采用细菌生长浊度法评价Cecropin A对铜绿假单胞菌的活性。结果 在BL21(DE3)和Transetta(DE3)感受态中均能表达His-SUMO-cecropin A蛋白，与SUMO标签融合成促进了Cecropin A在上清中的可溶表达。经两步镍亲和层析，可纯化得到0.447 mg·mL~(-1)的Cecropin A,3μmol·L~(-1)的Cecropin A与铜绿假单胞菌作用1 h后的ΔOD_(600)%为66.80%,Cecropin A对铜绿假单胞菌有抗菌活性。结论 通过与His-SUMO标签融合，可提高抗菌肽Cecropin A的可溶性，有利于蛋白纯化，纯化的Cecropin A对铜绿假单胞菌有较好的抗菌活性。
关键词：天蚕素抗菌肽;;Cecropin A;;可溶表达;;促溶标签;;SUMO;;His tag;;融合蛋白;;铜绿假单胞菌
基金资助：国家自然科学基金资助项目(批准号：81973226)
