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作者：李晓宇;赵殿元;张胜权;杨靖;唐丽;
单位：安徽医科大学基础医学院生化教研室;军事科学院军事医学研究院生命组学研究所;蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心,国家蛋白质科学中心;
摘要：目的 构建Csf1r~(Cre)Rosa26~(YFP)报告基因小鼠，检测Csf1r~(Cre)介导黄色荧光素蛋白(YFP)标记单核细胞及不同组织定居巨噬细胞的效率。方法 Rosa26~(YFP)突变小鼠具有一个lox P侧翼的STOP序列，后跟插入Rosa26基因座的黄色荧光蛋白基因(YFP)。当与表达Csf1r~(Cre)重组酶的小鼠交配时，STOP序列被删除，并在双突变后代Csf1r~(Cre)Rosa26~(YFP)的表达组织中观察到YFP表达。将Csf1r~(Cre)小鼠与Rosa26~(YFP)小鼠交配，通过PCR筛选出Csf1r~(Cre)Rosa26~(YFP)报告基因小鼠。分离成年Csf1r~(Cre)Rosa26~(YFP)小鼠的血液及骨髓单核细胞、肝脏巨噬细胞、肾脏巨噬细胞、肺泡巨噬细胞和脾脏巨噬细胞，标记流式抗体，通过流式细胞术分析Csf1r~(Cre)介导YFP标记组织巨噬细胞的效率。结果 Csf1r~(Cre)Rosa26~(YFP)报告基因小鼠中肾脏、肝脏、脾脏、肺泡巨噬细胞表达YFP中位数为93.25%、92.45%、91.10%、94.70%，血液单核细胞表达YFP中位数为98.20%，骨髓单核细胞表达YFP中位数为93.90%。结论 Csf1r~(Cre)可以介导YFP对各组织定居巨噬细胞以及骨髓和血液单核细胞进行示踪。同时，Csf1r~(Cre)可用作这些细胞的基因条件性敲除工具鼠。
关键词：Csf1r~(Cre)重组酶;;报告基因小鼠;;流式细胞术;;组织定居巨噬细胞;;单核细胞;;细胞标记效率
基金资助：国家自然科学基金项目(编号:32270941)~~
