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作者:高晨辉;张庆萍;梅岚;张明;王维顺;郑紧紧;樊吟秋;石海平;王频;
单位:安徽中医药大学针灸推拿学院;经脉脏腑相关安徽省重点实验室;安徽中医药大学第一附属医院;
摘要:目的:观察“化瘀通络”灸对血管性痴呆(VD)大鼠胼胝体少突胶质细胞相关蛋白表达及髓鞘超微结构的影响,探讨“化瘀通络”灸治疗VD的作用机制。方法:SD大鼠随机分为模型组、化瘀通络灸组、艾灸非穴位组,每组42只,并根据治疗时间分为1个疗程组(7 d,12只)、2个疗程组(14 d,12只)、4个疗程组(28 d,18只)。另取18只大鼠作为假手术组。采用改良的双侧颈总动脉结扎法制备VD大鼠模型。化瘀通络灸组取大鼠“百会”“大椎”“神庭”悬灸,每次20 min,每日1次,7 d为1个疗程。艾灸非穴位组取距其尾部2、3、5 cm处3个不对应任何穴位的部位进行悬灸,疗程同化瘀通络灸组。Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力;透射电镜法观察各组大鼠髓鞘超微结构,计算有髓神经轴突数量及髓鞘厚度比值(g-ratio);Western blot法和免疫荧光染色法检测各组大鼠胼胝体区少突胶质细胞标志物2’,3’-环核苷酸-3’-磷酸二酯酶(CNPase)、少突胶质细胞转录因子2(Olig2)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)蛋白表达水平和荧光强度。结果:与假手术组比较,模型组大鼠各时间点逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越原平台次数减少(P<0.01),髓鞘结构稀疏、模糊,部分膨出和崩解,少突胶质细胞形态不规则,髓鞘厚度变薄,胼胝体区有髓神经轴突数量明显减少(P<0.01),g-ratio值增大(P<0.01),CNPase、Olig2、MOG荧光强度及蛋白表达水平均降低(P<0.01);与模型组比较,化瘀通络灸组在干预2、4个疗程后逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越原平台次数增加(P<0.01),髓鞘结构较模型组得到明显修复,胼胝体区有髓神经轴突数量显著增加(P<0.01),g-ratio值减小(P<0.01),各疗程组CNPase、Olig2、MOG荧光强度及蛋白表达水平均升高(P<0.01,P<0.05),各疗程化瘀通络灸组均优于艾灸非穴位组(P<0.01)。结论:“化瘀通络”灸可能通过促进少突胶质前体细胞增殖分化为成熟少突胶质细胞,参与髓鞘再生,优化神经传导功能,从而改善VD大鼠学习记忆能力,以“化瘀通络”灸干预4个疗程作用最佳。
关键词:血管性痴呆;;化瘀通络灸;;少突胶质细胞;;髓鞘再生;;胼胝体
基金资助:国家自然科学基金项目(No.82104994);; 安徽省教育厅高校科学研究项目(No.KJ2021A0559);; 杨骏全国名中医传承工作室项目(No.皖中医药发展秘[2022]19号);; 第七批全国老中医药专家学术经验继承项目(国中医药办人教函)(No.[2021]272号)