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作者:王鑫;刘文宇;王莹;吴瑾;相博文;裴莹;
单位:辽宁中医药大学第一临床学院;辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心;辽宁中医药大学附属医院;
摘要:目的:观察刺络拔罐法对内毒素致热家兔的退热作用,并基于线粒体能量代谢探讨刺络拔罐法的中枢退热机制。方法:雄性日本大耳白兔随机分成空白组、模型组、西药组、刺络组、拔罐组、刺络拔罐组,每组12只。使用静脉注射内毒素复制家兔发热模型。西药组选用吲哚美辛(0.055 mg/mL)进行灌胃,刺络组在“大椎”处点刺,拔罐组家兔在“大椎”处使用-0.02 MPa罐压持续拔罐15 min,刺络拔罐组家兔采用相同方法先刺络再拔罐。记录各组家兔各时段体温变化,透射电镜观察各组家兔下丘脑组织线粒体超微结构,ELISA法检测家兔血清白细胞介素(IL)-1β和IL-6的含量,采用Oxygraph-2k线粒体呼吸能量测定系统检测家兔下丘脑组织线粒体呼吸功能,使用ATP含量检测试剂盒测定家兔下丘脑组织ATP含量,采用Western blot法检测下丘脑组织解偶联蛋白2(UCP2)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)的蛋白表达量。结果:与空白组相比,造模后模型组家兔体温显著升高(P<0.01);下丘脑组织线粒体形态破坏严重,嵴模糊、断裂甚至消失;血清IL-1β和IL-6含量增加(P<0.01),下丘脑组织线粒体耗氧量降低(P<0.05),ATP含量明显减少(P<0.01),UCP2蛋白表达量升高(P<0.01),Mfn2蛋白表达量降低(P<0.01)。与模型组相比,西药组、刺络拔罐组家兔体温在各个时间点均降低(P<0.01,P<0.05),刺络组、拔罐组在造模后2、3、4、6 h时体温降低(P<0.05);西药组、刺络组、拔罐组、刺络拔罐组下丘脑组织线粒体双层膜结构不完整,嵴模糊但未见明显断裂;拔罐组、西药组、刺络拔罐组血清IL-6含量降低(P<0.05,P<0.01),刺络组、拔罐组、西药组、刺络拔罐组IL-1β含量降低(P<0.05,P<0.01);刺络组、拔罐组、西药组、刺络拔罐组下丘脑组织线粒体耗氧量升高(P<0.05,P<0.01);西药组、拔罐组、刺络拔罐组下丘脑组织中ATP含量明显增加(P<0.01,P<0.05),西药组、刺络组、拔罐组、刺络拔罐组下丘脑组织中UCP2蛋白表达量降低(P<0.01,P<0.05),Mfn2蛋白表达量升高(P<0.01,P<0.05)。与西药组相较,刺络组家兔体温在造模后2~6 h升高(P<0.01,P<0.05),拔罐组在造模后2、3、5、6 h时升高(P<0.01,P<0.05)。与刺络拔罐组相较,刺络组家兔体温在造模后2、3、5、6 h时升高(P<0.01,P<0.05),拔罐组在造模后5、6 h升高(P<0.01,P<0.05)。结论:刺络拔罐法对内毒素致热家兔具有良好的退热作用,其作用机制可能是通过改善下丘脑组织线粒体呼吸功能以及调节参与ATP合成的重要蛋白,进而促进ATP合成来发挥退热作用。
关键词:发热;;刺络拔罐;;下丘脑;;线粒体;;能量代谢
基金资助:国家自然科学基金青年基金项目(No.82104992);; 辽宁省教育厅高校基本科研项目(No.2024-JYTCB-006)