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作者:杜开颜;刘承梅;高静;祁晨旭;曹静钰;王慧欣;段淑婷;
单位:河南中医药大学第一附属医院;河南中医药大学第一附属医院康复中心;
摘要:目的:观察艾灸改善脊髓损伤尿潴留大鼠膀胱纤维化的效应机制。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、艾灸组,每组12只。采用改良Allen’s垂直打击法建立大鼠脊髓损伤后尿潴留模型。艾灸组采用艾灸“关元”和“中极”干预,每次20 min,每日1次,持续14 d。采用尿流动力学分析仪检测大鼠膀胱功能,BBB评分量表评价大鼠后肢运动功能,HE染色检测膀胱组织的形态学改变,Masson染色观察膀胱组织肌束间胶原沉积情况并计算纤维化面积比,透射电镜观察大鼠膀胱组织线粒体形态结构,Western blot法检测膀胱组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)蛋白的表达水平,ELISA法检测血清中白细胞介素(IL)-1β和活性氧(ROS)的含量,比色法检测血清中亚铁离子(Fe~(2+))和膀胱组织中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量。结果:空白组与假手术组比较,各项指标的差异无统计学意义。与假手术组相比,模型组大鼠BBB评分显著降低(P<0.01),膀胱容量、漏尿点压力及膀胱顺应性都明显升高(P<0.01);大鼠膀胱组织中炎性细胞增多,膀胱平滑肌纤维形态紊乱,排列规律疏松,明显的胶原纤维沉积,纤维化面积比升高(P<0.01),膀胱线粒体结构改变;膀胱组织中Nrf2、HO-1、GPX4蛋白表达水平降低(P<0.01),CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达水平升高(P<0.01),大鼠血清中ROS、IL-1β、Fe~(2+)和膀胱组织中MDA含量升高(P<0.01),膀胱组织中GSH含量减少(P<0.01)。与模型组相比,经艾灸干预后,艾灸组大鼠膀胱组织炎性细胞明显减少,膀胱平滑肌纤维明显均匀排列紧密,胶原沉积得到明显改善,线粒体结构得到改善,各项检测指标均逆转(P<0.01)。结论:艾灸“关元”和“中极”可以抑制氧化应激和铁死亡的发生,延缓脊髓损伤尿潴留大鼠膀胱纤维化的进展。
关键词:脊髓损伤;;尿潴留;;氧化应激;;铁死亡;;膀胱纤维化
基金资助:河南省中医药管理局项目(No.2023ZY3003、2023ZXZX1037);; 河南省教育厅项目(No.22A360011)