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作者：井维尧;许从荟;刘翠;刘莉梅;袁博;张星华;张枫帆;陈平;杜小正;
单位：甘肃中医药大学针灸推拿学院;甘肃中医药大学附属医院针灸中心;甘肃省中医院针灸科;甘肃省中医院风湿骨病科;
摘要：目的：观察热补针法干预寒湿证类风湿关节炎（RA）家兔“足三里”的疗效及对膝关节滑膜组织中线粒体质量和动力蛋白相关蛋白1(Drp1)/线粒体分裂因子（Mff）通路的影响。方法：将24只新西兰白兔随机分为空白组、模型组、热补针法组、抑制剂组，每组各6只，采用卵蛋白完全弗氏佐剂混合液联合人工气候箱复制寒湿证RA家兔模型。予热补针法组家兔双侧“足三里”热补针法干预，1次/d，共14 d；予抑制剂组家兔腹腔注射线粒体分裂抑制剂Mdivi-1(2.5 mg/kg),1次/2 d，共7次。空白组与模型组采取相同的抓取和固定，不进行其他干预。在造模后及干预后评估家兔膝关节关节炎评分、痛阈及关节周径。采用HE染色观察膝关节滑膜组织病理学变化，透射电镜观察滑膜细胞线粒体超微结构，免疫荧光染色法检测滑膜组织线粒体活性氧（mtROS）表达，荧光素酶法检测滑膜组织ATP含量，免疫荧光染色法观察滑膜组织Drp1与Mff共定位水平，Western blot法检测滑膜组织磷酸化（p）-Drp1 s616/Drp1、Mff蛋白表达。结果：与空白组相比，模型组家兔关节炎评分、膝关节周径、膝关节滑膜组织中mtROS表达、p-Drp1 s616/Drp1比值及Mff蛋白表达、Drp1与Mff共定位水平升高（P<0.01），痛阈及膝关节滑膜组织ATP含量明显降低（P<0.01）。与模型组相比，热补针法组和抑制剂组家兔关节炎评分、膝关节周径、滑膜组织中mtROS表达、p-Drp1 s616/Drp1比值及Mff蛋白表达、Drp1与Mff共定位水平明显降低（P<0.01），痛阈、滑膜组织ATP含量明显升高（P<0.01）。模型组滑膜组织滑膜细胞增殖明显，滑膜内可见炎性细胞浸润及增生的滑膜基质，滑膜细胞中线粒体嵴模糊，线粒体肿胀破裂，线粒体形成分裂为小体；热补针法组及抑制剂组滑膜组织中上述改变均减轻。结论：热补针法可以显著改善寒湿证RA家兔症状，提高滑膜细胞线粒体质量，可能与抑制Drp1/Mff通路活性有关。
关键词：类风湿关节炎;;热补针法;;线粒体质量;;Drp1/Mff通路
基金资助：国家自然科学基金项目（No.82060891）;; 兰州市科技发展指导性项目（No.2023-ZD-207）;; 甘肃省针灸推拿临床医学中心项目（No.ZJKF2203）
