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作者：胡哲;马俊杰;马铁明;王列;于嘉祥;于冬冬;王树东;
单位：辽宁中医药大学针灸推拿学院;辽宁省针灸养生康复重点实验室;辽宁中医药大学附属医院;
摘要：目的：观察电针对膝关节骨关节炎（KOA）兔肠道菌群和关节软骨Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响，探讨电针调节KOA肠-关节轴反应的潜在机制。方法：32只CV级成年日本大耳白兔随机分为空白组、模型组、氨糖组、电针组，每组8只。采用改良Hulth法复制KOA兔模型。氨糖组予以盐酸氨基葡萄糖（20 mg/kg）灌胃，每周5次，连续4周。电针组予以双侧“血海”“阴陵泉”“犊鼻”电针治疗，每周5次，每次15 min，治疗4周。分别于造模后和治疗后采用Lequesne MG评分评估兔膝关节功能；HE染色法观察兔膝关节软骨病理形态变化；免疫荧光法检测兔膝关节软骨组织MyD88、NF-κB p65表达；Wes全自动蛋白质印迹定量分析法检测兔膝关节软骨组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平；16S rDNA高通量测序法分析肠道菌群结构变化。结果：与空白组比较，模型组兔膝关节Lequesne MG评分，软骨组织中MyD88、NF-κB p65阳性表达，MyD88、NF-κB p65、TLR4蛋白表达水平升高（P<0.05）。与模型组比较，氨糖组和电针组Lequesne MG评分，软骨组织中MyD88、NF-κB p65阳性表达，MyD88、NF-κB p65、TLR4蛋白表达水平降低（P<0.05）。与氨糖组比较，电针组软骨组织中MyD88、NF-κB p65、TLR4蛋白表达水平降低（P<0.05）。HE染色结果显示，空白组膝关节软骨表面光滑，软骨细胞数量、形态正常；模型组膝关节软骨表面薄而粗糙，细胞簇集明显、排列紊乱；氨糖组及电针组膝关节软骨表面相对平整，软骨细胞略有肥大，细胞核较为清晰。16S rDNA测序结果显示，与空白组比较，模型组Shannon指数升高（P<0.05），变形杆菌门、放线菌门、埃希氏菌-志贺氏菌、梭菌目UCG-014相对丰度升高，厚壁菌门、疣微菌门、丛毛单胞菌属、阿克曼氏菌相对丰度降低；与模型组比较，氨糖组和电针组Chao1指数、Shannon指数均升高（P<0.05），变形杆菌门、放线菌门、埃希氏菌-志贺氏菌相对丰度降低，厚壁菌门、丛毛单胞菌属、不动杆菌相对丰度升高。结论：电针可显著改善KOA兔膝关节损伤症状和功能，抑制软骨损伤和炎性反应，其机制可能与通过“肠-关节”轴调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达，调节肠道菌群多样性有关。
关键词：膝关节骨关节炎;;电针;;Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路;;炎性反应;;肠道菌群
基金资助：辽宁省科技厅面上项目(No.2023-MS-229);; 辽宁省教育厅课题(No.LJKZ0878)
