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作者:李桐;刘筱羽;王晓宇;骆敏;张知云;宿杨帅;景向红;
单位:中国中医科学院针灸研究所;
摘要:目的:观察功能性便秘、腹泻模型大鼠体表敏化区的分布特点,探究不同强度电针“天枢”对大鼠远端结肠运动的调节规律,明确肠神经系统(ENS)内不同亚型神经元在该调节效应中发挥的作用。方法:选用90只SPF级雄性SD大鼠,将其中15只大鼠随机分为正常组、便秘组、腹泻组,每组5只,观察粪便形态与含水量,以及尾静脉注射伊文氏蓝(EB)后大鼠体表EB渗出点的分布规律;18只大鼠随机分为正常+2 mA组、正常+4 mA组和正常+6 mA组,每组6只,利用生理信号采集分析系统记录、分析大鼠结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值,观察不同强度电针“天枢”对远端结肠蠕动的即刻效应;30只大鼠随机分为正常组、便秘组、腹泻组、便秘+2 mA组、腹泻+6 mA组,每组6只,观察电针“天枢”对便秘和腹泻模型大鼠结肠动力紊乱的累积效应;12只大鼠随机分为便秘+2 mA组、腹泻+6 mA组,每组6只,用于观察电针“天枢”对便秘和腹泻模型大鼠结肠动力紊乱的即刻效应;15只大鼠随机分为正常组、便秘组、腹泻组、便秘+2 mA组、腹泻+6 mA组,每组3只,采用whole-mount染色检测ENS内囊泡乙酰胆碱转运体(VAChT)阳性神经元和一氧化氮合酶(n NOS)阳性神经元表达情况。根据分组,通过盐酸洛哌丁胺灌胃(10 mg·kg-1·d-1,连续7 d)建立功能性便秘模型,番泻叶药液灌胃(10 mL/kg,每天1次,连续2 d)建立功能性腹泻模型;于双侧“天枢”行不同强度(电流2、4、6 mA)电针干预,连续波,频率10 Hz。结果:与正常组比较,便秘组大鼠粪便数量减少,粪便含水量降低(P<0.001);腹泻组大鼠出现便溏症状,粪便含水量升高(P<0.001)。便秘组和腹泻组大鼠体表EB渗出点可见于T6-S2节段区域,且在T10-L3节段的下腹部和下背部较为集中。与电针前比较,正常+2 mA组、正常+4 mA组大鼠电针过程中远端结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值升高(P<0.01,P<0.05),表现为促进性的即刻效应,2 mA电针具有后效应;而正常+6 mA组大鼠电针过程中远端结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值较电针前降低(P<0.001),呈现出抑制性的即刻效应。多次电针干预结束后,与电针前比较,便秘+2 mA组大鼠电针过程中结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值升高(P<0.05,P<0.01),腹泻+6 mA组大鼠电针过程中结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值降低(P<0.01,P<0.05);便秘+2 mA组大鼠结肠蠕动波曲线下面积高于便秘组(P<0.001),腹泻+6 mA组大鼠结肠蠕动波曲线下面积低于腹泻组(P<0.001);电针对便秘+2 mA组大鼠结肠动力的促进效应强于正常+2 mA组(P<0.05),电针的抑制效应在正常+6 mA组和腹泻+6 mA组大鼠间的差异无统计学意义(P>0.05)。远端结肠局部ENS中,2 mA电针激活VAChT阳性神经元的比例高于其激活n NOS阳性神经元的比例(P<0.001),而6 mA电针则以激活nNOS阳性神经元为主(P<0.001)。结论:功能性便秘和腹泻模型状态下,大鼠体表敏化区集中分布于T10-L3节段的下腹部和下背部区域。电针“天枢”对远端结肠运动具有双向调节作用,该效应与电针强度相关,且可能由不同亚型的ENS神经元介导完成。
关键词:功能性肠病;;电针;;天枢;;结肠运动;;双向调节;;肠神经系统
基金资助:国家重点研发计划资助项目:2022YFC3500702;; 国家自然科学基金面上项目:82274245;; 中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目:CI2021A03501;中国中医科学院科技创新工程创新团队项目:CI2021B011