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作者:王文;韩凌;梁仪春;梁树麟;覃湛;耿立果;何超拔;黄婷;袁少英;
单位:广州中医药大学第二临床医学院;省部共建中医湿证国家重点实验室/广州中医药大学第二附属医院;广东省中医药科学院中医药分子生物与系统生物学团队;广东省中医证候临床研究重点实验室;粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室;广东省中医院珠海医院男科;
摘要:目的:观察不同频率电针对少弱精子症(OAT)模型大鼠生精功能、睾丸形态及氧化应激的影响,探索电针干预OAT的作用机制及最优参数。方法:将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为溶剂对照组、模型组、2 Hz电针组、100 Hz电针组和2 Hz/100 Hz电针组,每组12只。除溶剂对照组外,其余4组大鼠以奥硝唑混悬液(800 mg·kg-1·d-1)灌胃28 d的方法制备OAT模型。从造模第1天开始,3个电针组均于“关元”“气海”及双侧“三阴交”“足三里”行电针干预,2 Hz电针组、100 Hz电针组、2 Hz/100 Hz电针组分别选择2 Hz连续波、100 Hz连续波和2 Hz/100 Hz疏密波,电流1~3 mA,每次30 min,隔日1次,连续28 d。干预后,计算各组大鼠睾丸指数,检测附睾精子质量,观察大鼠生育能力;HE染色法观察大鼠睾丸组织形态并计算Johnson评分;免疫荧光法检测大鼠睾丸组织活性氧(ROS)阳性表达;ELISA法检测大鼠睾丸组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量;Western blot法检测大鼠睾丸组织核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)及血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果:与溶剂对照组比较,模型组大鼠睾丸指数、精子浓度、精子活力及产仔数降低(P<0.01);生精小管萎缩,Johnson评分降低(P<0.01);睾丸组织SOD及CAT活性、Nrf2及HO-1蛋白表达降低(P<0.01);精子畸形率及睾丸组织ROS阳性表达、MDA含量升高(P<0.01)。与模型组比较,2 Hz电针组、100 Hz电针组及2 Hz/100 Hz电针组大鼠睾丸指数、精子浓度、精子活力及产仔数升高(P<0.05,P<0.01);睾丸组织病理形态改善,Johnson评分升高(P<0.01);睾丸组织SOD及CAT活性、Nrf2及HO-1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);精子畸形率及睾丸组织ROS阳性表达、MDA含量降低(P<0.05,P<0.01)。与2 Hz电针组比较,2 Hz/100 Hz电针组大鼠睾丸指数、精子浓度、精子活力及睾丸组织CAT活性、HO-1蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),睾丸组织ROS阳性表达降低(P<0.01);与100 Hz电针组比较,2 Hz/100 Hz电针组大鼠睾丸指数升高(P<0.01),睾丸组织ROS阳性表达降低(P<0.01)。结论:2 Hz低频连续波、100 Hz高频连续波、2 Hz/100 Hz疏密波电针均可改善OAT模型大鼠生精功能障碍,降低睾丸组织氧化应激水平,其机制可能与上调Nrf2、HO-1蛋白表达,改善氧化应激有关,其中2 Hz/100 Hz疏密波电针效果最优。
关键词:少弱精子症;;电针;;电针频率;;生精功能;;氧化应激
基金资助:珠海市科技局项目:2220004000307、2320004000300;; 广东省中医药局面上项目:202205111913416600;; 中国民族医药学会科研项目:2022Z1029-590302