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作者:黄于婷;林煜也;张国俊;曾楚凡;张夏;张靖宇;阚宇;方燕平;景向红;廖军;
单位:福建中医药大学针灸推拿学院;中国中医科学院针灸研究所;
摘要:目的:探讨电针诱导巨噬细胞极化促进肌卫星细胞增殖分化加速骨骼肌急性损伤修复的可能机制。方法:将42只SPF级SD大鼠随机分为空白组(6只)、模型组(18只)和电针组(18只)。模型组和电针组大鼠采用自制打击器建立右侧腓肠肌急性钝挫伤模型。造模后第1天开始,电针组大鼠予电针右侧“承山”“阳陵泉”,选用疏密波,频率2 Hz/100 Hz,电流约2 mA。每天1次,每次30 min,按取材时间分别干预3、7、14 d。采用Cat Walk XT~(TM)步态分析仪分析大鼠步态变化;HE染色观察大鼠右侧腓肠肌组织形态;Masson染色观察大鼠右侧腓肠肌胶原纤维变化;免疫荧光法检测大鼠右侧腓肠肌肌卫星细胞标志蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达;免疫组化法检测大鼠右侧腓肠肌巨噬细胞标记物CD68和CD206阳性表达;ELISA法检测大鼠血清相关促炎因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)]及抗炎因子[白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素13(IL-13)]含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠造模后第3、7天平均运动速度减小(P<0.05),造模后第3天右后肢步幅减小(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠造模后第7天平均运动速度及右后肢步幅均增大(P<0.05)。空白组大鼠右侧腓肠肌肌纤维间隙大小均匀一致,肌细胞之间排列整齐、规则;模型组大鼠右侧腓肠肌肌纤维间隙增大、水肿,可见红细胞及大量炎性细胞浸润,纤维化程度随时间延长逐渐增加;造模后第14天电针组大鼠右侧腓肠肌炎性细胞浸润恢复正常,纤维化程度明显低于模型组。与空白组比较,造模后第3、7、14天模型组大鼠右侧腓肠肌胶原纤维占比增加(P<0.05);与模型组比较,造模后第3、7、14天电针组大鼠右侧腓肠肌胶原纤维占比降低(P<0.05)。与空白组比较,造模后第3、7、14天模型组大鼠右侧腓肠肌PCNA阳性表达增加(P<0.05);与模型组比较,造模后第3、7天电针组大鼠右侧腓肠肌PCNA阳性表达增加(P<0.05)。与空白组比较,造模后第3天模型组大鼠右侧腓肠肌巨噬细胞CD68阳性表达增加(P<0.05);造模后第3、7、14天模型组大鼠右侧腓肠肌巨噬细胞CD206阳性表达增加(P<0.05)。与模型组比较,造模后第3天电针组大鼠右侧腓肠肌巨噬细胞CD68阳性表达降低(P<0.05);造模后第3、7天电针组大鼠右侧腓肠肌巨噬细胞CD206阳性表达增加(P<0.05),于造模后第7天达到最高峰。与空白组比较,模型组大鼠造模后第3、7天血清TNF-α含量增加(P<0.05),造模后第3、7、14天血清IL-1β含量增加(P<0.05),造模后第7天血清IL-10、IL-13含量增加(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠造模后第3天血清TNF-α含量降低(P<0.05),造模后第3、7天血清IL-1β含量降低(P<0.05),造模后第7天血清IL-10、IL-13含量升高(P<0.05)。结论:电针可通过调控肌卫星细胞的增殖分化促进急性腓肠肌钝挫伤后肌肉修复,这一过程与巨噬细胞极化关系密切。
关键词:骨骼肌急性损伤;;电针;;腓肠肌;;肌卫星细胞;;巨噬细胞
基金资助:国家自然科学基金资助项目:82204908、82074181、82374202;; 福建省科技厅项目:2023J01151、2022J01874;; 福建中医药大学校管课题:X2019010-人才专项;福建中医药大学针灸学科开放课题:XZJ2024003