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作者：李德坤;姚长风;单自亮;周政;张宪基;王科文;杜少林;
单位：安徽中医药大学针灸推拿学院;
摘要：目的：观察针刺对膝关节骨关节炎（KOA）大鼠膝关节软骨自噬的影响，并探讨其作用机制。方法：将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、悬吊组、针刺组、联合组，每组8只。除空白组外，其余组大鼠采用木瓜蛋白酶注射法建立KOA模型。悬吊组、针刺组、联合组分别行悬吊运动疗法（每次10 min，每日3次）、针刺（穴取右侧“阳陵泉”“足三里”“犊鼻”，每次30 min，每日1次）及联合疗法（悬吊运动疗法联合针刺）进行干预，连续6 d后休息1 d，持续4周。干预前后评估大鼠Lequesne MG评分。干预后，采用HE染色法观察大鼠右膝关节软骨组织形态，并评定Mankin评分；ELISA法检测大鼠血清白细胞介素（IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量；实时荧光定量PCR法检测大鼠右膝关节软骨组织Ⅱ型胶原蛋白（COL2）、Ⅹ型胶原蛋白（COL10）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、自噬调控蛋白（Beclin-1）mRNA表达；Western blot法检测大鼠右膝关节软骨组织PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、mTOR、磷酸化mTOR(p-m TOR)、Beclin-1蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠Lequesne MG评分升高（P<0.01）；右膝关节软骨厚度变薄，软骨细胞数量减少且排列杂乱，Mankin评分升高（P<0.01）；血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量升高（P<0.01）；右膝关节软骨组织COL2、Beclin-1 mRNA及Beclin-1蛋白表达降低（P<0.01）,COL10、PI3K、Akt、mTOR mRNA及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较，悬吊组、针刺组和联合组大鼠Lequesne MG评分降低（P<0.01）；右膝关节软骨厚度增加，软骨细胞排列改善，Mankin评分降低（P<0.01）；血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低（P<0.01）；右膝关节软骨组织COL2、Beclin-1 mRNA及Beclin-1蛋白表达增加（P<0.05,P<0.01）,COL10、PI3K、Akt、mTOR mRNA及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）。与悬吊组、针刺组比较，联合组大鼠Lequesne MG评分降低（P<0.01）;Mankin评分降低（P<0.05,P<0.01）；血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低（P<0.05）；右膝关节软骨组织COL2、Beclin-1 m RNA及Beclin-1蛋白表达增加（P<0.05）,COL10、PI3K、Akt、m TOR mRNA及p-PI3K、p-Akt、p-m TOR蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）。结论：针刺可以促进KOA大鼠膝关节软骨修复和细胞自噬，降低炎性反应，从而缓解软骨退变，作用机制可能与调节PI3K/Akt/m TOR信号通路有关。
关键词：膝关节骨关节炎;;针刺;;悬吊运动疗法;;自噬;;PI3K/Akt/mTOR信号通路
基金资助：安徽省自然科学基金面上项目：1508085MH165;; 安徽省教育厅科研研究计划重大项目：2024AH040155;; 安徽省中医骨伤科学教学创新团队项目：2022cxtd082
