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作者：林佳蓉;王顺意;罗芳;林翠英;林振宇;
单位：福州大学生物科学与工程学院;福州大学化学学院,食品安全与生物分析教育部重点实验室,福建省食品安全分析与检测重点实验室;
摘要：藻蓝蛋白具有良好的荧光特性，在分析检测、食品和医药领域应用广泛。本研究以钝顶螺旋藻干粉为初始原料，通过系统优化，建立了藻蓝蛋白的高效提取-纯化联用工艺。首先采用溶胀-酶解法联用策略从藻体中提取藻蓝蛋白，通过单因素实验考察了体系pH值、酶解时间及酶解温度等因素对藻蓝蛋白提取率的影响。在此基础上，基于Box-Behnken响应面实验设计，以提取液中藻蓝蛋白浓度和纯度为响应指标，建立了三因素三水平的回归模型。经模型预测及实验验证，最优条件为：体系pH 6.4、酶解时间3.2 h、酶解温度35.4℃。在此条件下，藻蓝蛋白的提取率达到26.6%。随后，采用聚乙二醇-磷酸盐双水相萃取体系对提取液进行纯化，最终使藻蓝蛋白纯度提升至4.21。研究结果表明，溶胀-酶解联合提取工艺可有效破碎藻细胞结构，显著提高藻蓝蛋白的释放效率；双水相萃取体系在温和条件下实现了目标蛋白的选择性分配与富集。本工艺具有提取效率高、纯化过程温和、可操作性强等优点，适用于天然藻蓝蛋白的高效制备，为其在分析检测、天然色素和生物医药等领域的应用提供了实验基础和工艺支持。
关键词：藻蓝蛋白;;提取工艺;;双水相萃取;;分离纯化
基金资助：福建省高校产学合作项目(No.2023Y4002);; 福州市科学技术局项目(No.2024-G-002)资助~~
