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作者：贺伟华;苏柳;刘聪;张干;章钢刚;赖晓翠;邓省亮;
单位：江西省科学院微生物研究所;
摘要：以己烯雌酚模拟表位保守序列YVYP为骨架，采用人工编码方式设计并合成了随机七肽核苷酸序列，通过扩增获得编码随机七肽的基因片段，利用分子生物学技术构建噬菌体展示己烯雌酚模拟表位随机七肽库。采用三轮亲和淘选，获得己烯雌酚新的模拟表位，并以其替代传统化学合成的检测抗原，建立了基于抗原模拟表位的己烯雌酚免疫学检测方法。结果表明，构建的噬菌体展示己烯雌酚模拟表位随机七肽库的库容量为1.23×10~6pfu，重组阳性率为90%，插入序列不同率为93.3%，己烯雌酚新模拟表位的氨基酸序列为YVYPQMP。基于此噬菌体模拟表位建立的噬菌体酶联免疫吸附分析（Phage-ELISA）方法的半数抑制浓度（IC_(50)）为0.146 ng/mL，检出限（IC_(10)）为0.029 ng/mL，线性范围为0.03～1.00 ng/mL，具有良好的选择性。采用本方法检测鸡肉、鱼肉和虾肉中的己烯雌酚，加标回收率为81.0%～94.1%，相对标准偏差为4.6%～8.3%。本方法灵敏度高、特异性好，适用于动物源性食品中己烯雌酚的测定。
关键词：噬菌体展示肽库;;模拟表位;;己烯雌酚;;酶联免疫吸附分析法
基金资助：国家自然科学基金项目（No.31960502）;; 江西省重点研发计划项目（No.20202BBFL63039）;; 江西省科学院省级财政科研项目经费包干制试点示范项目（No.2023YSBG22010）资助~~
