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作者:蔡文正;杨梦慧;张蒙蒙;张梦颖;张成桂;徐士奎;杨自忠;
单位:大理大学药学院/云南省昆虫生物医药研发重点实验室;云南省食品药品监督检验研究院科技与标准化研究所;
摘要:目的:由于蜘蛛类的物种繁多,常导致该类药材相互混淆,存在用药的安全隐患,亟待建立一种能准确识别棒毛络新妇及其混淆品的分子鉴定方法。方法:针对采集的70份样品提取DNA,分析其COⅠ序列的特征、计算种内和种间遗传距离并构建ML系统发育树,评估COⅠ序列作为鉴定棒毛络新妇及其混淆品的有效性。使用R语言绘图软件将分子条形码转换成QR二维码,建立专属的DNA条形码库,并对市售的8份蜘蛛类药材进行实测验证。结果:棒毛络新妇的COⅠ序列长度为603 bp, GC含量为31.8%~32.5%,存在16个碱基变异位点,共有14种单倍型(Hd=0.8236),表明样本群体具有丰富的多样性。种间平均遗传距离(0.1685)显著大于种内平均遗传距离(0.0034),且与DNA Barcoding Gap检验结果一致,说明COⅠ序列与其他物种之间具有一定的DNA条形码间隙。在构建的系统发育树中,不同的物种均各自聚为单支。实测验证的8份市售样品中有6份样品鉴定为棒毛络新妇,2份伪品也被准确识别,其准确率达100%。结论:该研究建立的COⅠ序列分子鉴定方法专属性强,可以有效地解决棒毛络新妇完整药材及其粉末的物种鉴定问题。
关键词:棒毛络新妇;;花蜘蛛;;真伪鉴别;;细胞色素C氧化酶Ⅰ;;DNA条形码
基金资助:国家自然科学基金项目(32160113);; 云南省科技厅基础研究专项-重点项目(202301AS070083);; 云南省重大科技专项计划项目(202002AA100007);; 云南省“兴滇英才支持计划”团队项目(202305AS350001)