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作者:杨建树;王雪峰;张秀英;穆婧雯;史俊祖;蔡壮;
单位:辽宁中医药大学第一临床学院;辽宁中医药大学附属医院中医儿科;
摘要:目的:建立小鼠肺炎支原体肺炎(MPP)模型,探讨清金通络颗粒能否通过调控线粒体自噬,抑制NLRP3炎性小体激活,发挥肺保护作用。方法:随机将50只幼龄BALB/c小鼠分为正常对照组、模型组和清金通络颗粒低(0.15 g/mL)、中(0.3 g/mL)、高(0.6 g/mL)剂量组,每组10只,除正常对照组外其余各组小鼠连续滴鼻肺炎支原体(MP)菌液3 d建立肺炎支原体肺炎模型,造模成功后24 h予灌胃治疗,连续治疗14 d。HE染色观察小鼠肺组织病理改变;试剂盒检测各组小鼠肺组织ROS水平;ELISA法检测肺组织与血清IL-1β、IL-18水平;透射电镜观察肺组织内线粒体超微结构与自噬情况;Western Blot检测NLRP3、Caspase-1、ASC、PINK1、Parkin、Beclin1、P62、TOMM20、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达;免疫荧光检测线粒体标记蛋白TOMM20与自噬蛋白LC3共定位表达。结果:与模型组比较,清金通络颗粒能显著降低MPP小鼠肺指数和肺组织ROS水平,改善MPP小鼠肺组织病理损伤,恢复线粒体超微结构,显著降低MPP小鼠肺组织与血清IL-1β、IL-18水平,显著升高肺组织中自噬蛋白LC3表达,显著降低线粒体标志物TOMM20表达,显著升高MPP小鼠肺组织PINK1、Parkin、Beclin1蛋白表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平,显著降低MPP小鼠肺组织NLRP3、Caspase-1、ASC、P62、TOMM20蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:清金通络颗粒能改善MPP诱导的线粒体功能障碍,降低炎症反应并改善肺损伤,其机制可能与激活线粒体自噬有关。
关键词:清金通络颗粒;;肺炎支原体肺炎;;线粒体自噬;;NLRP3炎性小体;;PINK1/Parkin
基金资助:国家自然科学基金项目(82374521);; 国家传承创新中心重点病种项目(2023-247)