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作者：贺媛;陈佳悦;钱正明;金李玲;黄琦;李文庆;
单位：东莞市东阳光冬虫夏草研发有限公司/国家中医药管理局重点研究室;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司;珠海横琴东阳光冬虫夏草有限公司;
摘要：目的：建立一种能够快速鉴别僵蚕及其混伪品的特异性聚合酶链式反应(PCR)方法。方法：将测序得到的感染僵蚕的菌种白僵菌Beauveria bassiana ITS序列与近源物种基因序列进行比对，根据变异位点较多的片段设计特异性引物TF2/TR2,并对PCR反应条件进行优化和验证。结果：当退火温度为64℃,循环30次时，14批僵蚕、含僵蚕的药材粉末及白僵菌标准样品均可在258 bp处扩增得到单一清晰的目标条带，而其余27批混伪品均无此条带。结论：该研究所建立的特异性PCR方法准确地实现了僵蚕药材及其混伪品的真伪鉴定，该方法专属性良好，操作方便快捷，适用于僵蚕药材的质量控制，为解决僵蚕药材的品质稳定性和安全性问题提供了技术保障。
关键词：僵蚕;;白僵菌;;特异性引物;;聚合酶链式反应
基金资助：2023年度湖北省自然科学基金中医药创新发展联合基金项目(2023AFD157)
