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作者：李芳芳;郭慧文;黄玲;陈奕杉;郑里翔;
单位：江西中医药大学中药学院;
摘要：目的：探讨六味地黄丸合二至丸含药血清对与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)共培养条件下三阴性乳腺癌4T1细胞上皮间充质转化(EMT)的调控作用，以及对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响。方法：采用C57小鼠提取中性粒细胞，用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导成NETs,并运用Western Blot检测NETs标志物CitH3的表达。69只SPF级昆明小鼠随机分为六味地黄丸(11.7 g/kg)组、二至丸(36.9 g/kg)组、六味地黄丸合二至丸(35.1 g/kg)组，每组各23只，灌胃相应药物5 d后取血分离血清。实验设空白对照组、模型组、紫杉醇组、六味地黄丸含药血清组、二至丸含药血清组、六味地黄丸合二至丸含药血清组，CCK-8法检测细胞增殖活力；细胞划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测4T1细胞的迁移和侵袭；免疫荧光试验检测CitH3、MPO表达；Western Blot检测EMT相关蛋白和HMGB1/TLR4信号轴相关蛋白表达。结果：成功诱导NETs,建立NETs-4T1共培养体系。与空白对照组比较，模型组细胞增殖活力和迁移、侵袭能力显著升高，E-cadherin蛋白表达显著降低，CitH3、MPO荧光强度和N-cadherin、Vimentin、TLR4、HMGB1蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较，各给药组细胞增殖活力和迁移、侵袭能力显著降低，E-cadherin蛋白表达显著升高，CitH3、MPO荧光强度和N-cadherin、Vimentin、TLR4蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。六味地黄丸合二至丸的作用显著优于单用六味地黄丸或二至丸。结论：六味地黄丸合二至丸以通过抑制NETs,调控HMGB1/TLR4信号通路抑制4T1细胞EMT特征表达，抑制4T1细胞的迁移和侵袭。
关键词：六味地黄丸合二至丸;;中性粒细胞胞外诱捕网(NETs);;4T1细胞;;上皮-间充质转化(EMT);;HMGB1/TLR4信号轴
基金资助：国家自然科学基金项目(81160531);; 江西省自然科学基金重点项目(20232ACB206053);; 江西省科技厅重点研发计划项目(20203BBGL73205)
