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作者:丁芮;王翔;王靓;周鹏;黄金玲;
单位:安徽中医药大学;中药复方安徽省重点实验室;
摘要:目的:探讨白术内酯Ⅲ对H_2O_2诱导H9c2心肌细胞炎症反应的作用及机制。方法:以H_2O_2诱导H9c2细胞构建炎症反应模型,实验分空白对照组、模型组及白术内酯Ⅲ15、30、60μmol/L组。细胞免疫荧光检测线粒体ROS水平;qPCR检测细胞中IL-1β、TNF-α、iNOS、IL-4、IL-10、Arg-1 mRNA表达;Western Blot检测细胞中IL-1β、TNF-α、iNOS、TRIM38、NAP1、IRF3蛋白表达。通过转染siRNA下调TRIM38表达,观察白术内酯Ⅲ对H_2O_2作用下H9c2细胞线粒体ROS及细胞中IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA及NAP1、IRF3蛋白表达的影响。结果:与空白对照组比较,模型组细胞线粒体ROS生成显著增加,IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA及IL-1β、TNF-α、iNOS、NAP1、IRF3蛋白表达显著升高,IL-4、IL-10、Arg-1 mRNA及TRIM38蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,白术内酯Ⅲ干预能显著减少细胞线粒体ROS生成,显著降低IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA及IL-1β、TNF-α、iNOS、NAP1、IRF3蛋白表达,显著升高IL-4、IL-10、Arg-1 mRNA及TRIM38蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。TRIM38下调后,白术内酯Ⅲ上述作用减弱。结论:白术内酯Ⅲ能调控心肌细胞TRIM38-NAP之间的平衡,抑制下游IRF3激活,减少线粒体ROS释放,促进抗炎信号传导,抑制炎症反应。
关键词:白术内酯Ⅲ;;TRIM38;;H_2O_2;;心肌细胞;;炎症反应
基金资助:国家自然科学基金项目(30973707,81373533,81973844)