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作者:魏升;钟光辉;曹晓丹;张荣荣;毛青云;
单位:浙江中医药大学附属宁波市中医院;
摘要:目的:观察雷公藤甲素对TGF-β_1诱导下大鼠肾小管上皮细胞TGF-β_1/ERK/TFEB信号通路的影响,探讨其对肾小管细胞损伤的保护作用及可能的机制。方法:应用TGF-β_1建立肾小管细胞损伤模型,实验分空白对照组、模型组、自噬抑制剂(3-MA)组及雷公藤甲素高(10 ng/mL)、中(5 ng/mL)、低(2.5 ng/mL)浓度组,采用CCK-8法检测细胞活力,溶酶体荧光探针检测自噬现象,qRT-PCR检测各组细胞中ERK2、TFEB mRNA表达,Western Blot检测细胞中TGF-β_1、LC3、Beclin1、Smad3蛋白表达。结果:与模型组比较,雷公藤甲素各组细胞形态明显改善,溶酶体荧光强度减弱,细胞活力显著升高,TGF-β_1、LC3、Beclin1蛋白表达显著降低,雷公藤甲素中、低浓度组ERK2 mRNA表达显著降低,高浓度组TFEB mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:雷公藤甲素可改善细胞形态,有效提升细胞活力,对肾小管上皮细胞起到保护作用,其可能是通过调控TGF-β_1/ERK/TFEB通路,下调LC3、Beclin1水平,干预肾小管上皮细胞自噬水平实现的。
关键词:雷公藤甲素;;肾小管上皮细胞;;自噬;;TGF-β_1;;ERK;;TFEB
基金资助:国家自然科学基金项目(82205063);; 浙江省自然基金项目(HDMY24H270004);; 浙江省中医药科技计划项目(2021ZB251);; 宁波市科技计划项目(2022J284)