来源:期刊VIP网 时间:
作者:买尔哈巴·依布拉音;王子航;王伟;杨灵洁;关丽娜;穆玉明;
单位:新疆医科大学第一附属医院心脏超声诊断科;新疆超声医学重点实验室;乌鲁木齐市友谊医院超声科;
摘要:目的 构建载miRNA-452/Let-7i的超声分子探针,体外分析其对人诱导多能干细胞来源心肌细胞(hi PSCs-CMs)的靶向效果。材料与方法 合成生物素化核心脂质微泡(NBs)、携带过表达miRNA-452/Let-7i的腺病毒的脂质微泡(Ad-miR-452/Let-7i)和携带过表达miRNA-452/Let-7i的腺病毒及靶向蛋白MYH6的超声分子探针(Ad-miR-452/Let7i-MYH6),比较荧光蛋白表达率验证其结合情况。测量其理化性质、稳定性及体外造影成像能力,评估生物安全性等。将hi PSCs-CMs分为Ad-miR-452/Let-7i组和Ad-miR-452/Let7i-MYH6组,比较细胞结合情况。结果 构建的NBs、Ad-miR-452/Let-7i以及Ad-mi R-452/Let7i-MYH6形态规则,稳定性好;其浓度分别为(1.62±0.40)×10~8个/ml、(1.83±0.20)×10~8个/ml、(1.35±0.33)×10~8个/ml,平均粒径分别为(605.94±17.46)nm、(726.53±14.95)nm、(729.31±16.62)nm,电位分别为(2.61±0.30)mV、(-11.21±0.71)mV、(-12.28±0.52)mV,分散度分别为0.24±0.07、0.26±0.14、0.25±0.13。在浓度为107个/ml时,3种样品的造影强度分别为99.24±5.04、102.18±3.61、99.07±3.87。载mi RNAs超声分子探针对细胞无明显毒性,体外显影持续超过15 min,可与hi PSC-CMs特异性结合。结论 本研究构建的超声分子探针具有稳定性及体外靶向性,能有效提高病毒转染效率。
关键词:腺病毒科;;转染;;超声学;;分子探针;;人诱导多能干细胞来源心肌细胞;;实验研究
基金资助:国家自然科学基金(82260347);; 新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目(2022D01D67);新疆维吾尔自治区自然科学基金面上项目(2021D01A48);; 新疆医科大学第一附属医院卓越人才与创新团队培养项目(cxtd202424)