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作者：郑东东;冯涛;郝荣增;杨彪;晏子龙;齐晓兰;郑海学;
单位：中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室;甘肃省病原生物学基础学科研究中心;
摘要：本研究旨在探究宿主蛋白HERC4对口蹄疫病毒（FMDV）复制的影响，首先利用CRISPR/Cas9技术在PK15细胞中构建了HERC4基因敲除细胞系，通过DNA测序和蛋白免疫印迹试验证明构建的基因敲除细胞系成功，然后在BHK21细胞中转染不同剂量的HERC4蛋白表达质粒，制备了HERC4基因过表达细胞，随后在HERC4基因敲除细胞和过表达细胞中，分别利用蛋白免疫印迹、实时荧光定量和病毒滴度测定方法检测了HERC4蛋白对FMDV复制的影响，结果表明，HERC4蛋白对FMDV复制有影响，敲除可以抑制病毒复制，过表达可以促进病毒复制。该研究结果为后续开展HERC4蛋白调控FMDV复制机制研究奠定了基础。
关键词：口蹄疫病毒;;宿主蛋白HERC4;;基因敲除;;基因过表达
基金资助：甘肃省联合科研基金重点项目（23JRRA1478）;; 国家重点研发计划项目（2021YFD1801300）;; 科技创新2030重大项目（2023ZD0404301）;; 兰州市科技计划项目（2024-8-12）;; 国家自然科学基金重点项目（32330107）;国家自然科学基金青年科学基金项目（32302855）;; 中国博士后科学基金面上资助项目（2023M733818）
