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作者：秦千策;宋军澎;Mahdi Borhani;张藜潇;丁静;
单位：吉林大学人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室;青岛普瑞森医药科技有限公司;新疆医科大学省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室;
摘要：探讨旋毛虫C型凝集素（TsCTL）对小鼠的免疫调节作用。将TsCTL基因（GenBank登录号KRY42391.1）克隆到原核表达载体pET-28a （+）中，构建重组质粒pET-28a (+)-TsCTL，并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将重组TsCTL(rTsCTL)纯化、复性，并通过Western-blot鉴定，同时测定内毒素水平。使用rTsCTL刺激小鼠脾细胞，通过CCK-8法检测细胞活力，并采用qPCR检测脾细胞转录因子的表达水平。将10只C57BL/J小鼠随机分为对照组（n=5）和实验组（n=5）。实验组小鼠每只皮下注射50μg的rTsCTL（溶解在200μL PBS中），每周3次，持续4周。对照组则使用等量的PBS进行相同处理。收集实验组和对照组小鼠的脾细胞，并使用ELISA和qPCR检测细胞因子和转录因子的表达水平。最后，采用流式细胞术检测调节性T细胞的增殖情况。结果显示：rTsCTL对脾细胞无毒性。qPCR结果表明，rTsCTL能够提高小鼠脾细胞中Gata3和Foxp3的表达水平，同时降低T-bet的表达水平。动物实验的qPCR结果与细胞实验的结果一致。ELISA结果显示，rTsCTL促进了TGF-β和IL-4的表达，而抑制了IFN-γ的表达。流式细胞术检测结果表明，rTsCTL能够增加调节性T细胞的比例。这些结果表明，rTsCTL可以促进Th2型免疫反应，并抑制Th1型免疫反应。
关键词：旋毛虫;;C型凝集素;;免疫调节
基金资助：国家重点研发计划项目（2023YFE0107300）;; 吉林省教育厅自然科学基金项目（JJKH2023-1200KJ）
