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作者:单依依;刘娜;程子龙;陈益;王晓楠;张纹纹;李文良;杨蕾蕾;冯志新;刘茂军;
单位:南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室;兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心;新疆农业大学动物医学学院;
摘要:旨在通过检测和分析绵羊肺炎支原体(Mo)感染细胞后的毒力相关指标,建立绵羊肺炎支原体毒力评价细胞模型。本研究使用10~8CCU_(50)/m L的5株已知毒力的Mo菌株感染MDBK细胞系,使用IFA和qPCR技术检测Mo菌株的黏附能力;通过倒置显微镜观察细胞病变;使用试剂盒检测细胞活性、细胞毒性百分比和胞内H_2O_2含量。根据显著性分析结果,对5株Mo菌株进行毒力评价。根据相关性分析结果,筛选细胞感染毒力评价模型中与Mo菌株毒力最相关的毒力评价指标。细胞感染毒力评价模型的结果显示,IK3-3和NJ01株的黏附能力、对细胞活性的损伤作用、对细胞膜完整性的破坏作用、对细胞的介导作用均强于Y98、N3-2F和XLY株。IK3-3和NJ01为强毒力菌株,N3-2F和XLY为中等毒力菌株,Y98为毒力较弱菌株,这与前期感染羊的结果一致。相关性分析结果显示,细胞感染毒力评价模型的各项毒力评价指标均具有可行性,其中,Mo菌株的黏附能力与Mo毒力最具有相关性。本试验建立的Mo菌株的体外毒力评价模型可为研究Mo的致病机制、筛选疫苗候选株提供新的试验平台。
关键词:绵羊肺炎支原体;;毒力;;细胞感染
基金资助:国家自然科学基金青年基金项目(32202809);; 江苏省农业科学院探索性颠覆性项目[ZX(21)1218];; 动物疫病防控全国重点实验室开放基金项目(SKLVEB-KFKT-04)