我们的服务符合学术规范和道德
专业 高端让您使用时没有后顾之忧

中国兽医科学2025年第05期:A型塞内卡病毒的分离鉴定及3A蛋白的多克隆抗体制备

来源:期刊VIP网 时间:


作者:韩松;段宏勇;杨楠;王树茂;高飞;赵款;周艳君;童武;姜一峰;童光志;李丽薇;

单位:中国农业科学院上海兽医研究所;河南师范大学生命科学学院;河北农业大学动物医学院;

摘要:A型塞内卡病毒(senecavirus A,SVA)作为一种可以引起猪水泡样症状的外来病原,与口蹄疫病毒引起的临床症状难以区分。本研究成功分离1株SVA,将其命名为HN2019。经全基因组测序和进化分析发现,该分离株与我国毒株CH-HN-2017亲缘性最高。该毒株可在猪肾传代细胞(PK-15)、乳仓鼠肾细胞(BHK-21)中有效复制增殖,感染后均能产生细胞病变。通过病毒一步生长曲线、间接免疫荧光、Western-blot等试验研究了该毒株的生物学特性。同时,利用pCold-TF质粒构建该毒株非结构蛋白3A的原核表达载体,转化大肠杆菌表达系统,发现该重组蛋白可在上清中可溶性表达。将纯化后的重组蛋白分4次免疫BALB/c小鼠,成功制备针对3A蛋白的多克隆抗体。该抗体效价为1∶128 000,可特异性识别病毒感染的细胞产生特异性荧光,证明该抗体具有良好的反应性和特异性,为进一步研究SVA 3A蛋白的生物学功能及病毒的致病机制提供了有效工具。

关键词:A型塞内卡病毒;;遗传进化分析;;3A蛋白;;多克隆抗体

基金资助:上海市科技兴农项目(2022-02-08-00-12-F01162);; 国家重点研发计划项目(2022YFD1800305);; 中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-CSLPDCP-202301)