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作者:鲍安玉;杜晓悦;陈思旭;段续接;张培;刘淑英;
单位:内蒙古农业大学兽医学院;农业农村部动物临床诊疗技术重点实验室;内蒙古自治区基础兽医学重点实验室;
摘要:为了探究SAD1/UN84结构域蛋白-2(SAD1/UNC84 domain protein-2,SUN2)在绵羊肺腺瘤病(ovine pulmonary adenocarcnoma,OPA)肿瘤细胞恶性转化中的功能,本试验利用实验室保存的JSRV env慢病毒感染绵羊肺成纤维细胞(OAR-L1),建立了OAR-L1-Env稳转株。通过qPCR和Western-blot检测JSRV Env和SUN2的表达情况,使用CCK-8、划分愈合试验和软琼脂糖集落形成试验检测细胞的恶性转化能力。此外,分别构建SUN2过表达和干扰质粒,并转染OAR-L1-Env稳转株,利用qPCR和Western-blot检测其SUN2的表达情况,通过CCK-8和划分愈合试验检测细胞的增殖和迁移能力。结果显示,OAR-L1-Env稳转株成功建立,且SUN2表达量显著下调(P<0.05),CCK-8、划分愈合试验和软琼脂糖集落形成试验表明OAR-L1-Env稳转株发生恶性转化。OAR-L1-Env稳转株中过表达SUN2可抑制细胞的增殖和迁移能力(P<0.05),而干扰SUN2则促进细胞的增殖和迁移能力(P<0.05)。综上所述,本研究表明SUN2参与调控JSRV Env诱导的细胞恶性转化,提示其可能对OPA肿瘤生成有抑制作用。本研究为进一步探究SUN2在OPA中的细胞增殖等生物学作用的研究提供了一定的参考资料。
关键词:稳转株;;囊膜蛋白;;SUN2;;增殖;;迁移
基金资助:国家自然科学基金项目(32072819,32360863);; 内蒙古科技重大专项(2021ZD0010);; 内蒙古草原英才创新团队项目(20151031);; 内蒙古自治区教育厅高校创新团队建设项目(BR22-13-08);内蒙古自治区教育厅一流学科科研专项(YLXKZX-NND-012);; 兽医基础与牛羊疫病防控技术研发创新团队项目(NMGIRT2412)