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作者：张慧艳;李坤;孙梦阳;邢向川;付元芳;李平花;李冬;卢曾军;曹轶梅;
单位：中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;甘肃省病原生物学基础学科研究中心;
摘要：为建立口蹄疫病毒（FMDV）O型、A型、Asia 1型通用结构蛋白抗体检测方法，本研究用FMDV各血清型间高度保守的结构蛋白VP2氨基端短肽为抗原，经过条件优化，建立了可检测牛血清中FMDV不同血清型结构蛋白抗体的间接ELISA方法，并分析了该方法的敏感性、特异性、重复性以及与液相阻断ELISA(LPB-ELISA)的符合性。结果显示，该短肽最佳包被浓度为2μg/m L，最适封闭液为1%BSA+5%蔗糖，血清最佳稀释度为1∶4，酶标二抗稀释比例为1∶5 000。以约登指数最大作为临界值，测定其敏感性为87.5%，特异性为93%，与牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）的阳性血清均未出现交叉反应，且批间与批内变异系数均≤10%。与LPB-ELISA的符合率为92.59%。该方法耗时短、操作简捷，可检测牛血清中FMDV不同血清型结构蛋白抗体，为FMDV感染的诊断和群体免疫状况的评估提供了一种通用方法。
关键词：口蹄疫病毒;;结构蛋白VP2;;通用型;;间接ELISA
基金资助：甘肃省科技重大专项(23ZDNA007);; 中国农业科学院兰州兽医研究所所级重点任务(CAAS-ASTIP-JBGS-20230402)
