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作者：张仕涵;孙安琪;单心;屈广隆;汤正旭;仉鑫悦;刘紫璇;王一冰;胡静涛;
单位：吉林农业大学动物医学院;动物重大疫病微生态疫苗(药物)教育部工程研究中心;吉林省动物微生态与健康养殖重点实验室;
摘要：为阐明植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum,LP）胞外囊泡（extracellular vesicles,EVs）对猪轮状病毒（PoRV）增殖复制的抑制作用。本研究采用超滤浓缩联合超高速离心的方法分离纯化植物乳杆菌EVs，通过透射电镜、纳米粒径分析、BCA蛋白定量、SDS-PAGE和琼脂糖核酸电泳等方法对胞外囊泡的形态、粒径大小、蛋白和核酸进行鉴定分析。同时以猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）为研究对象，通过EVs与IPEC-J2共作用，检测IFN-β的转录和表达，明确EVs对IPEC-J2抗病毒功能的影响。感染PoRV后，通过TCID_(50)检测病毒滴度，RT-q PCR检测PoRV NSP4基因转录，以明确EVs对PoRV在IPEC-J2细胞中增殖复制的影响。结果显示，成功获得植物乳杆菌EVs，透射电镜显示EVs呈球状小泡结构，粒径直径平均约为132.5 nm，蛋白浓度为2.5 mg/m L,DNA含量为238.35μg/m L,RNA含量为258.8μg/m L。EVs与IPEC-J2共培养12 h能显著促进IFN-β的转录和表达，抑制PoRV在IPEC-J2细胞中的增殖。本研究结果为探索乳酸菌调控宿主固有免疫发挥抗病毒作用机制提供了理论依据。
关键词：植物乳杆菌;;胞外囊泡;;IFN-β;;猪轮状病毒
基金资助：吉林省科技厅中青年科技创新创业卓越人才(团队)项目(创新类)(20240601058RC);; 吉林省大学生创新创业训练计划项目(S202310193135,S202410193009)
