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作者：张娟;张宇;曹丽艳;段月月;李璐瑶;袁聪;孔祥雨;郑海学;王琦;
单位：新疆农业大学动物医学学院;中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室;中国农业科学院都市农业研究所;
摘要：多种商品化猪伪狂犬病病毒（PRV）疫苗毒株基因组缺失US9和US2基因。为探究US9和US2蛋白在鉴别PRV野毒株感染及疫苗毒株免疫的猪血清，以及抗US9和US2蛋白多克隆抗体在鉴别PRV野毒株及疫苗毒株感染细胞的可行性，本研究通过原核表达系统表达PRV US9和US2蛋白，纯化后免疫小鼠制备多克隆抗体。研究结果表明，经纯化处理的US9和US2蛋白在间接酶联免疫吸附试验（ELISA）中表现出特异性识别能力，能够与感染野毒株PRV CD22的猪血清发生免疫反应，但与接种疫苗毒株PRV Bartha-K61的猪血清不反应。此外，试验制备的小鼠抗US9和US2蛋白多克隆抗体在蛋白质印迹试验（Western-blot）和间接免疫荧光试验（IFA）中均能特异性识别PRV CD22感染的细胞，而不与疫苗毒株PRV Bartha-K61感染的细胞发生反应。本研究成功获得了具有鉴别诊断价值的PRV US9和US2蛋白及其多克隆抗体，为深入探索PRV US9和US2蛋白的功能特性，以及开发基于PRV疫苗毒株的新型诊断试剂奠定了重要基础。
关键词：猪伪狂犬病病毒;;US9蛋白;;US2蛋白;;原核表达;;多克隆抗体
基金资助：动物疫病防控全国重点实验室开放基金项目（SKLADCPKFKT202410）;; 国家自然科学基金面上项目（32473022）;; 中国农业科学院科技创新工程项目（ASTIP2024-34-IUA-07）;中国农业科学院杰出青年英才项目（王琦）
