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作者:林睿;贺煜竣;范郁山;覃宁婧;张卉;黄敬文;
单位:广西中医药大学针灸推拿学院;
摘要:目的 观察不同时期朱琏兴奋Ⅰ型针法对糖尿病神经源性膀胱(DNB)大鼠Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)、磷脂酰激酶3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路的影响,探讨该针法治疗DNB的机制。方法 将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、针法预防组、针法治疗组、针法预防+治疗组各10只。腹腔注射链脲佐菌素制备DNB大鼠模型。朱琏针法选取大鼠“中极”“三阴交”“列缺”“太冲”穴,针法预防组于6~9 w每日捆绑行针法、针法治疗组于10~13 w每日捆绑行针法,针法预防+治疗组于6~13 w每日捆绑行针法,各组无针法干预需要时每日常规捆绑。比较各组膀胱最大容量、残余尿量、膀胱湿重;苏木素-伊红染色观察膀胱组织形态;Western印迹检测PI3K、AKT蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定ROCK1、ROCK2、P-PI3K、P-AKT蛋白表达;实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)检测ROCK1、ROCK2、PI3K、AKT mRNA表达。结果 与对照组比较,模型组、针法预防组、针法治疗组、针法预防+治疗组膀胱最大容量、残余尿量、膀胱湿重增加,ROCK蛋白和mRNA表达升高,PI3K/AKT蛋白和mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,针法治疗组、针法预防组、针法预防+治疗组膀胱最大容量、残余尿量、膀胱湿重降低,ROCK蛋白和mRNA表达降低,PI3K/AKT蛋白和mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);针法治疗组、针法预防组、针法预防+治疗组膀胱最大容量、残余尿量无统计学差异(P>0.05),膀胱湿重依次降低,ROCK蛋白和mRNA表达依次降低,PI3K/AKT蛋白和mRNA表达依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 朱琏兴奋Ⅰ型针法有利于改善大鼠膀胱功能,其机制可能与其下调DNB大鼠膀胱组织中ROCK表达量、上调PI3K/AKT通路表达量有关,而预防性干预的效果要优于发作后干预,预防、治疗联合干预优于单纯预防性干预或发作后干预。
关键词:朱琏兴奋Ⅰ型针法;;治未病;;糖尿病神经源性膀胱;;Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK);;磷脂酰激酶3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路
基金资助:国家自然科学基金(No.82260983);; 广西研究生教育创新计划项目(No.YCBZ2023149,YCSW2022351)