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作者：赵淑庆;张宝太;刘孟冉;薛涛;钟纯燕;周金柱;刘传敏;主性;倪艳秀;李基棕;李彬;
单位：江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室;南京工业大学生物与制药工程学院;贵州大学动物科学学院;临沂大学药学院;黔南民族职业技术学院生物工程系;南京农业大学动物医学院;江苏大学生命科学学院;
摘要：为了构建以乙肝核心抗原(HBcAg)为载体呈现PEDV S1抗原表位的病毒样颗粒并评价其免疫原性。本研究以HBcAg作为免疫原载体，将PEDV S1中的B细胞表位~(748)YSNIGVCK~(755)插入HBcAg的主要免疫显性区域(MIR)，克隆至pET-28a(+)载体，转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达，IPTG进行诱导表达后，通过SDS-PAGE、Western blot鉴定纯化后的重组蛋白，通过透射电镜检测其形态学，制备疫苗皮下注射免疫BALB/c小鼠，对其免疫效果进行了初步评价。结果表明，成功构建重组质粒PET-28a(+)-HBcAg-PEDV S1，并在BL21(DE3)中以包涵体形式表达，纯化、复性后的重组蛋白透射电子显微镜观察到病毒样颗粒结构。制备的疫苗能诱导小鼠产生较高水平的抗体和中和抗体。上述研究表明，本研究构建的HBcAg-PEDV S1能组装成病毒样颗粒，免疫原性较强，具有成为新型候选疫苗的潜力。
关键词：猪流行性腹泻;;乙肝核心抗原;;病毒样颗粒;;免疫原性
基金资助：十四五国家重点研发计划项目(2021YFD1800014);; 江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(20)3094);; 国家自然科学基金(31802167、31872481和31941013);; 江苏省自然科学基金(BK20190003,BK20191235);; 山东省自然科学基金(ZR2020MC019)
