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作者：王真真;汤傲星;刘春草;李娜;林亮亮;宋若楠;贾楠楠;杜汉宇;朱杰;李传峰;刘光清;孟春春;
单位：中国农业科学院上海兽医研究所;新疆农业大学;
摘要：为建立一种检测猫杯状病毒抗体的间接ELISA方法，本试验将截短的猫杯状病毒VP1蛋白表达为重组蛋白纯化后作为包被抗原。采用棋盘式方法优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量，同时对间接ELISA方法的其他反应条件进行了比较。结果显示，抗原包被量为2 μg/mL，血清最佳稀释度为1∶1000，37 ℃作用1 h；二抗的最佳工作浓度为1∶10 000；TMB底物显色液37 ℃避光显色反应15 min。特异性试验结果显示，同FPV和FHV阳性血清均无交叉反应。此方法对猫细小病毒阳性血清的敏感性为1∶40 960；组内、组间变异系数均小于5%。与本实验室建立的包被全病毒的方法平行比较，显示其检测阴阳性血清的值高度一致。结果表明，建立的基于截短的猫杯状病毒VP1蛋白建立的间接ELISA方法非常适用于临床样本的检测，可为猫杯状病毒的防控工作提供技术支撑。
关键词：猫杯状病毒;;VP1蛋白;;串联的B细胞表位;;间接ELISA
基金资助：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2021JB08)
