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作者：邓鑫;魏博文;彭文婧;颜其贵;赵勤;黄小波;文翼平;杜森焱;曹三杰;伍锐;
单位：四川农业大学动物医学院猪病研究中心;
摘要：本研究通过比对伪狂犬病病毒变异株与经典株的gE基因，选择其保守区域设计了1对特异性引物，建立了一种快速检测猪伪狂犬病病毒的荧光定量PCR检测方法。结果表明，所建立的gE基因荧光定量PCR检测方法重复性好，批内和批间的变异系数分别为0.62%～1.30%和0.47%～1.36%；此方法对日本乙型脑炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒以及伪狂犬疫苗毒株均无扩增反应，特异性强；敏感性实验表明此方法能检测到的最低模板拷贝浓度为100拷贝/μL，比普通PCR敏感性高100倍。对76份临床样本同时进行荧光定量PCR与普通PCR反应，其中荧光定量PCR检测阳性率为42.11%(32份)，普通PCR检测阳性率为36.84%(28份)，两种方法的符合率为95%；对其中4份荧光定量PCR检测为阳性但普通PCR检测为阴性的PCR扩增产物进行测序，结果均为gE目的基因片段。因此，本研究建立的gE基因荧光定量PCR检测方法快速、准确，能够用于伪狂犬野毒感染和疫苗免疫的鉴别诊断。
关键词：伪狂犬病病毒;;gE基因;;SYBR GreenⅠ;;荧光定量PCR
基金资助：国家重点研发项目(2023YFF0724501)
