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作者：谭钦文;黄晶晶;钟瑞熙;杜沅沁;徐健;农金丽;彭玉姣;
单位：广西中医药大学研究生院;广西中医药大学第一附属医院脾胃肝病科;广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室;
摘要：目的 利用细胞实验探索鳖甲煎丸对肝细胞癌增殖、迁移及有氧糖酵解的抑制作用，并探索其内在机制。方法 选取人肝癌细胞株（Huh7）作为研究对象，随机将SD大鼠分为空白血清组、鳖甲煎丸高、中、低剂量组及抑制剂组，制备含药大鼠血清，用以孵育Huh7细胞。CCK-8、划痕实验探索鳖甲煎丸对肝癌细胞的增殖、迁移的影响，糖酵解限速酶及代谢产物检测探索鳖甲煎丸对肝癌细胞有氧糖酵解的影响，RT-qPCR、Western Blot实验探索鳖甲煎丸对AKT/mTOR信号通路的mRNA、相关蛋白及磷酸化的表达。多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t或Dunnettg T3检验。结果 与空白血清组相比，鳖甲煎丸组的OD值、不同时间段的迁移率、糖酵解限速酶（己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶）及糖酵解代谢产物（丙酮酸、乳酸、ATP）检测均显著降低（P值均<0.05）;RT-qPCR结果显示，与空白血清组比较，鳖甲煎丸高、中、低剂量组的mTOR mRNA表达水平均下调，高、低剂量组的AKT mRNA表达水平下调（P值均<0.05）;Western Blot结果显示，与空白血清组比较，鳖甲煎丸高、中、低剂量组的mTOR相关蛋白及磷酸化蛋白表达水平均下调，高、中剂量组的AKT相关蛋白及磷酸化蛋白表达水平均下调（P值均<0.05）。结论 初步验证了鳖甲煎丸含药血清可以抑制人肝癌细胞Huh7细胞的有氧糖酵解，从而抑制其增殖、迁移，其机制可能与抑制AKT/mTOR信号通路的相关蛋白表达有关。
关键词：鳖甲煎丸;;肝肿瘤,实验性;;瓦尔堡效应,肿瘤学
基金资助：广西自然科学基金（2022GXNSFAA035460,2024GXNSFDA010005）;; 广西研究生教育创新计划项目（YCSW2023395,YCSY2023021）;; 广西中医药大学引进博士科研启动基金项目（2022BS026）~~
