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作者：钦圣兰;吴眉;周扬;平键;徐列明;
单位：上海中医药大学肝病研究所;湖州市中心医院;上海中医药大学附属曙光医院;上海市中医临床重点实验室;肝肾疾病病证教育部重点实验室(上海中医药大学);上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院;
摘要：目的 探讨扶正化瘀方对肝纤维化小鼠外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes, PBL)及肝内淋巴细胞(intrahepatic lymphocyte, IHL)亚群的影响。方法 C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组(9只)和造模组(18只),造模组给予高脂饮食同时予以2 mL/kg体质量的剂量腹腔注射10%CCl_4,正常组小鼠等量橄榄油腹腔注射。第3周将造模组分为模型组、扶正化瘀方组。造模同时，扶正化瘀方组小鼠给予扶正化瘀方(0.5 g干粉溶于20 mL ddH_2O,剂量为20 mL/kg)灌胃，正常组和模型组以等剂量双蒸水灌胃，均1次/d,共4周。第6周末麻醉处死小鼠，检测血清肝功能，HE、天狼猩红染色评价小鼠肝损伤及纤维化程度，肝组织冰冻切片免疫荧光染色观察CD~+_4T、CD~+_8T、NK定位。取小鼠外周血及肝组织制备单个核细胞悬液，用多色流式细胞术检测外周血及肝脏淋巴细胞亚群分布。结果 扶正化瘀方能改善CCl_4联合高脂饮食诱导的模型小鼠肝功能，减轻肝组织炎症损伤和胶原沉积。免疫荧光染色表明CD~+_4T、CD~+_8T、NK细胞均向纤维间隔浸润，沿纤维间隔分布。与正常组相比，模型组小鼠外周血CD~+_8T显著升高[0.34(0.16 vs 0.59(0.27,P<0.05)],CD~+_4T/CD~+_8T、NK/CD~+_8T显著减少[(1.97±0.62)vs(1.46±0.17)、(4.45±1.41)vs(1.80±0.96),均P<0.05],肝内CD~+_8T显著升高[(3.70±1.21)vs(6.42±2.41),P<0.05],CD~+_4T/CD~+_8T显著减少[(1.05±0.14)vs(0.84±0.20),P<0.05];经扶正化瘀方治疗后，小鼠外周血中CD~+_8T较模型组显著减少[(0.37±0.16)vs(0.59±0.27),P<0.05],外周血NK、CD~+_4T/CD~+_8T、NK/CD~+_8T较模型组明显增加[(1.63±0.59)vs(0.96±0.30)、(1.73±0.36)vs(1.46±0.17)、(5.30±2.24)vs(1.80±0.96),P<0.05]。同时肝内NK、CD~+_4T/CD~+_8T、NK/CD~+_8T也较模型组明显增加[(4.35±0.98)vs(2.73±0.73)、(1.00±0.13)vs(0.84±0.20)、(0.73±0.21)vs(0.48±0.24),P<0.05]。结论 扶正化瘀方抗肝纤维化作用机制可能与通过减少肝纤维化小鼠外周血中CD~+_8T比例，升高外周血及肝内NK、CD~+_4T/CD~+_8T、NK/CD~+_8T有关。
关键词：扶正化瘀方;;肝纤维化;;淋巴细胞
基金资助：国家自然科学基金面上项目(81573794)
