来源:期刊VIP网 时间:
作者:张冰冰;马苏芳;张雯雯;李悦;李新;郭宏;郭益文;张林林;胡德宝;丁向彬;
单位:天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁殖与健康养殖重点实验室;
摘要:为了探索RNA甲基化转移酶ZC3H13对牛骨骼肌卫星细胞(BSMSCs)增殖分化的调控作用,试验采用qRT-PCR方法检测ZC3H13基因在BSMSCs增殖期和分化期mRNA相对表达量并筛选出最佳si-ZC3H13,将si-ZC3H13转染至BSMSCs进行体外培养,采用qRT-PCR和Western-blot方法对BSMSCs增殖标志基因Pax7、Ki-67及分化标志基因MyoG、MyHC mRNA和蛋白的相对表达量进行检测。结果表明:BSMSCs分化第1天(DM1)、分化第3天(DM3)ZC3H13基因mRNA相对表达量均显著低于增殖期(P<0.05)。干扰ZC3H13基因后,与si-NC相比,Pax7、Ki-67基因mRNA相对表达量差异不显著(P>0.05),Pax7蛋白相对表达量差异不显著(P>0.05)。细胞中肌管数量减少,肌管直径减小。与si-NC相比,MyoG基因mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),其蛋白相对表达量极显著降低(P<0.01);MyHC基因mRNA相对表达量差异不显著(P>0.05),蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。说明ZC3H13基因对BSMSCs增殖无显著影响,但对其成肌分化存在调控作用,干扰ZC3H13基因可抑制BSMSCs的成肌分化。
关键词:牛;;ZC3H13;;牛骨骼肌卫星细胞(BSMSCs);;细胞增殖;;细胞分化
基金资助:天津市“131”创新型人才培养工程第一层次人选资助项目