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作者：赵世芳;王金泉;陈伟丽;阮志栋;彭斌;
单位：新疆农业大学动物医学学院;乌鲁木齐县农产品质量安全检测中心;
摘要：为了解新疆喀什地区鸽源金黄色葡萄球菌的污染及耐药情况，试验采集该地区肉鸽养殖场和屠宰场各类型样本共188份[包括鸽粪样本108份，屠宰环节样本51份(体表样本2份、鸽笼样本4份、屠宰工具样本18份、工人手样本3份、胴体样本24份)、内脏样本29份(肝脏组织样本14份、肠道组织样本15份)],根据《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》(GB 4789.10—2016)对金黄色葡萄球菌进行分离与纯化，提取疑似金黄色葡萄球菌菌株的基因组DNA后，对nuc基因和16S rDNA基因进行PCR扩增，统计不同类型样本中金黄色葡萄球菌的分离率，随机选取部分能够同时扩增两种基因的来自不同类型样本的分离菌株16S rDNA基因的测序结果进行同源性分析和系统进化树构建，采用Kirby-Bauer(K-B)法对所有分离菌株进行21种常用抗生素的药物敏感性试验，分析多重耐药性，并采用PCR方法进行耐药基因检测。结果表明：从188份待检样品中共分离出70株疑似金黄色葡萄球菌(36株来自鸽粪样本，29株来自屠宰环节样本，5株来自内脏样本);70株分离菌均扩增出大小为223 bp的nuc基因和大小为1 466 bp的16S rDNA基因。所有样本的金黄色葡萄球菌分离率为37.23%(70/188),其中屠宰环节样本的分离率最高(56.86%,29/51),其次是鸽粪样本(33.33%,36/108),内脏样本分离率最低(17.24%,5/29);在屠宰环节样本中，工人手样本分离率最高(100%,3/3),其次为屠宰工具样本(61.11%,11/18),体表、鸽笼和胴体样本相对较低(均为50.00%)。选取的10株分离菌株[鸽粪(GF1和GF2)、屠宰工具(T1和T2)、胴体样本(D1和D2)各2株，工人手(S)、鸽笼(GL)、内脏(N)、体表样本(TB)各1株]16S rDNA基因与参考菌株的核苷酸序列相似性介于95.6%～100%之间，差异性介于0～4.3之间。由系统进化树可见，分离株D1、D2、S、GF1、T1均与金黄色葡萄球菌PSTJ-92、RM-AST-SA004、HN-5、H56、118A、DSM20231、ST2、DM20231处于一个小分支，且与分离株T2、GF2汇聚为一个大分支；分离株GL与TB处于一个小分支，与上述菌株亲缘关系较远。70株分离株对青霉素的耐药率最高(88.57%,62/70),对氨苄西林、阿莫西林、红霉素、阿奇霉素、克林霉素的耐药率较高，分别为75.71%(53/70)、72.86%(51/70)、62.86%(44/70)、57.14%(40/70)、51.43%(36/70);而对妥布霉素的耐药率均为0。70株分离菌中，有57株(81.43%,57/70)分离菌存在不同程度的多重耐药情况(对3类或3类以上抗生素同时呈现耐药性),其中有2株分离菌高达6重耐药(2.86%,2/70);多重耐药主要集中在3重耐药(31.43%,22/70),然后依次为4重(27.14%,19/70)、5重(20.00%,14/70)和2重耐药(8.57%,6/70)。在70株分离菌中，bla_(SHV-1)基因的携带率(65.71%,46/70)最高，然后依次为ermC基因(48.57%,34/70)和parC基因(37.14%,26/70),glrA、vanA、vanB基因的携带率均为0。在36株来自鸽粪的分离菌中，bla_(SHV-1)基因的携带率(72.22%,26/36)最高，然后依次为parC基因(55.56%,20/36)、ermC基因(41.67%,15/36)和tetM基因(22.20%,8/36)。在29株来自屠宰环节样本的分离菌中，bla_(SHV-1)和ermC基因的携带率(均为62.07%,18/29)最高，然后依次为tetC基因(37.93%,11/29)、parC基因(20.69%,6/29)、mecA基因(17.24%,5/29)。在5株来自内脏样本的分离株中，tetC基因的携带率(60.00%,3/5)最高，bla_(SHV-1)基因的携带率较高(40.00%,2/5),tetM、ermB、ermC、bla_(TEM)基因的携带率均为20.00%(1/5)。说明屠宰环节肉鸽源金黄色葡萄球菌污染情况普遍存在，该地区鸽源金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、红霉素等抗生素的耐药率较高，耐药情况较为严重，同时携带多种耐药基因。
关键词：肉鸽;;金黄色葡萄球菌;;细菌分离;;细菌鉴定;;nuc基因;;16S rDNA基因;;遗传进化;;耐药性
基金资助：自治区重大科技专项(2023A02007);; 中央引导地方科技发展专项资金项目(ZYYD2022C13);; 新疆农业大学大学生创新项目(DXSCX2024450)
